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目的：探讨柠檬酸钠(Sodium citrate, CT)与三氧化二砷(Arsenic trioxide, AS)联合应用对胃癌细胞的抑制作用及其机制,观察二者联合用药是否具有协同性。为在临床上抑制胃癌生长,提高患者生存率提供实验依据。方法：用柠檬酸钠(Sodium citrate)(终浓度为5mm01／L)和(或)不同浓度的三氧化二砷(Arsenic trioxide)(终浓度依次为5、10umol/L)处理体外传代培养的人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-803。每株细胞分为6个实验组,应用荧光倒置显微镜观察细胞增殖情况,并进行细胞计数；流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化；RT-PCR法观察抗凋亡相关基因bcl-2. mcl-1表达的变化。对于所得实验数据用Excel软件进行归类和计数。用均数±标准差表示计量资料,数据统计分析用SPSS17.0软件进行,组与组之间比较采用重复测量的方差分析及单变量的方差分析,两两比较采用SNK方法。P<0.05具有统计学意义。结果：1.细胞形态观察：活细胞计数及细胞生长抑制率实验组在加药干预24h和48h后,通过倒置荧光显微镜观察,和对照组相比,对照组细胞生长呈多个角的形状,细胞贴壁生长良好,其生长密度随着时间的增长而增加。24h后实验组两株细胞增殖都受到不同程度的抑制,表现为漂浮细胞增多,细胞收缩变圆脱壁漂浮,细胞密度有不同程度的下降；48h后,以上情况表现更为明显。与对照组相比,实验组活细胞计数均有不同程度的降低,细胞增殖抑制率有不同程度的升高(P<0.05)。48h与24h比较,细胞增殖抑制率更为明显(P<0.05)。2.细胞凋亡①各实验组凋亡率与对照组相比显著升高(P<0.05)。②同一细胞,同一时间段,AS 10umol/L组的细胞凋亡率显著高于AS 5umol/L组(P<0.05)。③同一细胞,同一时间段,两种药物合用组的细胞凋亡率显著高于两种药物相应浓度的单用组(P<0.05)。④同一时间段,CT 5mmol/L合用AS 10umol/L组凋亡率高于CT 5mmol/L合用AS 5umol/L组(P<0.05)。⑤同一细胞,同一药物浓度,干预48h的细胞凋亡率高于干预24h的凋亡率(P<0.05)。3.细胞周期的变化两株细胞分别经CT 5mmol/L、AS 5umol/L、AS 10umol/L、CT 5mmol/L合用AS 5umol/L, CT 5mmol/L合用AS 10umol/L处理,对照组只加细胞培养液。24h、48h后,分别经流式细胞仪检测,发现细胞明显被阻滞于G2/M期,致G2/M期细胞上升；G2/G1期显著减少。实验组与对照组相比差异有统计学意义。细胞分裂受到抑制,凋亡率增加。对照组未见到明显的亚二倍体峰,各实验组均检测到典型的亚二倍体峰。4.细胞抗凋亡基因bcl-2、mcl-1的表达①实验组bcl-2、mcl-1基因相对表达量均较对照组下降。②同一细胞,同一时间段,AS 10umol/L组的基因相对表达量较AS 5umol/L组下降(P<0.05)。③同一细胞,同一时间段,两种药物合用的基因相对表达量均比两种药物单用的相应浓度组下降(P<0.05)。④同一细胞,同一时间段,CT 5mmol/L合用AS 10umol/L组基因相对表达量较CT5 mmol/L合用AS 5umol/L组下降(P<0.05)。药物浓度的增加与基因相对表达量下降呈负相关。结论：1.柠檬酸钠(Sodium citrate)与三氧化二砷(Arsenic trioxide)单用后均对胃癌细胞的生长有抑制作用,其抑制作用在随着药物浓度及药物作用时间的延长而增加。两种药物合用后其抑制作用增加。2.柠檬酸钠(Sodium citrate)与三氧化二砷(Arsenic trioxide)对胃癌细胞有诱导凋亡作用,其作用与药物浓度及作用时间有关。两种药物合用对胃癌细胞的凋亡具有协同性,且具有时间和浓度的依赖性。3.柠檬酸钠(Sodium citrate)与三氧化二砷(Arsenic trioxide)联合应用具有协同抑制胃癌细胞生长、繁殖和促进其凋亡的作用,其机制可能与细胞生长周期阻滞、增强诱导胃癌细胞凋亡以及调控凋亡相关基因bcl-2、mcl-1的表达有关。