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植物根结线虫(Meloidogyne spp.);是世界上危害最严重的植物病害之一,可以侵染5000多种植物。其二龄幼虫侵入植物根系并形成根结,极大的阻碍了植物对营养及水分的吸收,造成植物产量减少,品质降低。据估计,全球每年因根结线虫所造成的损失超过1000亿美元。因此,迫切需要找到防治根结线虫的新途径。本研究在已公布的南方根结线虫(Meloidogyne incongnita)与北方根结线虫(Meloidogyne hapla)基因组序列的基础上,筛选出南方根结线虫生长发育相关RNAi靶标基因,通过多种RNAi技术来抑制调控线虫生长发育基因的表达,从而降低其对寄主的危害。主要研究结果如下：1.根据已公布的南方根结线虫、北方根结线虫和秀丽杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因组数据及wormbase库中RNAi数据,应用生物信息学方法,预测了50个潜在的RNAi靶标候选基因。根据预测的靶标基因设计引物,对综合得分较好的30个南方根结线虫候选靶标基因进行克隆,共得到了25个与根结线虫生长发育相关的靶标基因。2.构建了综合得分较高的南方根结线虫中编码线粒体ATP合成酶b亚基基因(MiASB) TRV2-MiASB瞬时表达载体,通过TRV方法表达MiASB基因的dsRNA并分析了其番茄根结数量的影响。结果表明,接种60d后,TRV2-MiASB处理的番茄植株中线虫MiASB下调基因表达,沉默处理的番茄植株根结数比空载体对照减少了64.3%,比清水对照降低了64.1%。结果表明,MiASB基因沉默对根结线虫病害具有很好的防控效果,也说明MiASB基因可能参与线虫的致死性。3.在VIGS瞬时表达dsRNA研究的基础上,构建双链RNA植物表达载体pCAGC1341-dsASBi,以根癌农杆菌介导转化番茄(品种Moneymaker),得到5株转基因番茄,经过繁殖后形成5个转基因株系。将5个株系的TO代阳性植株用于抗南方根结线虫试验,转MiASB基因dsRNA植株的根结数量明显减少,5个株系的根结减退率高达为51%～75.4%,说明番茄表达双链MiASB基因能显著抑制南方根结线虫。4.构建了真菌表达MiASB基因dsRNA的载体pHDT-dsAsbi,并成功转化生防菌尖孢镰刀菌CS-20,利用该生防菌处理番茄和黄瓜植株,盆栽和大田试验均表明,处理植株处理的病情较对照植株明显减轻,根结数量显著下降。