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农药的大量使用所带来的食品安全、耐药性和抗药性等问题既严重损害了环境质量,又破坏了生态平衡,因此以海洋微生物为研究对象并对其进行高效开发利用,以期研发出绿色环保、易于降解的高效天然农药。本论文主要对2株菌株进行规模发酵,利用活性跟踪技术进行分离纯化进行深入研究。首先,对青岛海域采集的藻类、螃蟹、牡蛎等海洋生物进行海洋内生真菌分离纯化,得到5株海洋真菌菌株,然后进行4W优化培养以及活性筛选,得到2株优势菌株D和E:均在RICE培养基产物量最大,TLC板检测发现其在MH1和RICE培养基中的次级代谢产物较为丰富,且E菌株的代谢物中含有显红色和黄色斑点的特殊物质;MH1培养基得到的代谢产物对B.subtilis和S.aureus具有一定的抑菌活性。经分子生物学鉴定菌株D和E分别为Trichoderma koningiopsis(简写为TK)和Fusarium tricinctum(简写为FT)。将菌株TK和FT进行规模发酵,活性跟踪发现菌株TK的Fr3-Fr9和菌株FT的Fr6-Fr7组分具有较强的抑菌活性。通过制备板薄层层析(HPLC)、重结晶及各种柱层析等方法对各组分进行分离纯化,获得30余个单体化合物,并对部分单体化合物的抑菌活性进行研究。结果表明:化合物FT-12对B.subtilis具有很强的抑制作用,抑菌圈直径为20mm(阳性对照为34mm);FT-18对E.coli表现出较强的抑菌活性,抑菌圈直径为19mm(阳性对照为33mm);FT-26对6种指示菌(B.subtilis、B.thuringiensis、E.coli、S.aureus、P.aeruginosa、X.campestris)均表现出较强的抑菌活性,抑菌圈直径为14mm~30mm,为Fr8的主要活性物质组分,值得深入研究。