羟基喜树碱对A549人肺腺癌细胞株作用的实验研究

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目的:通过培养A519人肺腺癌细胞,观察羟基喜树碱对肺癌细胞增殖及凋亡的影响,以阐明其作用机制,探究其最佳用药浓度,为临床治疗提供合理的实验依据。方法:培养A549人肺腺癌细胞,加入含有不同浓度羟基喜树碱的RPMI-1640完全培养液,用MTT法检测肿瘤细胞增殖情况及筛选出羟基喜树碱的最佳用药浓度,光镜、电镜观察其凋亡情况,免疫细胞化学法检测TGF-β1及Smad4蛋白在肿瘤细胞中的定位及表达。结果:(1)MTT显示含有不同浓度羟基喜树碱的RPMI-1640完全培养液作用24h、48h、72h后,对A549人肺腺癌细胞的抑制作用不同,其中浓度为100μg/ml组作用48h效果最佳,抑制率达68.65%。(2)光镜、电镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征。(3)免疫细胞化学法显示羟基喜树碱能显著影响A549人肺腺癌细胞TGF—β1、Smad4的表达。结论:(1)羟基喜树碱具有抑制A549人肺腺癌细胞增殖的作用。(2)羟基喜树碱的最佳用药浓度为100μg/ml。(3)羟基喜树碱能诱导A549人肺腺癌细胞凋亡。(4)羟基喜树碱具有下调TGF—β1、上调Smad4在A549人肺腺癌细胞中表达的作用。(5)羟基喜树碱通过诱导A549人肺腺癌细胞凋亡及下调TGF—β1、上调Smad4在A549人肺腺癌细胞中的表达而发挥其抗肿瘤作用。
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