[目 的]以轮状病毒Wa株为研究对象,探讨马蹄香提取物对轮状病毒的体外抗病毒作用,为马蹄香抗轮状病毒的应用提供理论依据。[方 法]体外培养MA104细胞来扩增人轮状病毒Wa株,选取轮状病毒VP6基因构建标准品质粒,通过SYBR法RT-qPCR检测临床轮状病毒阳性粪便样品的病毒拷贝数来验证标准品质粒。不同浓度的马蹄香提取物分别作用于体外培养的MA104细胞,培养72h后用CCK-8法测OD值,计算细胞存活率。采用TCIDso法检测轮状病毒滴度。通过抗病毒综合实验来研究马蹄香提取物对轮状病毒的抗病毒作用。[结 果]成功构建轮状病毒VP6基因标准品质粒,标准曲线方程是y=-0.2542x+11.547,R2=0.9993,R2>0.99,Ct 值在 13.67～33.56 范围内线性良好,特异性高,扩增曲线稳定,熔解曲线单一。临床轮状病毒阳性粪便样品的病毒拷贝数如下:原倍样品 574790.0995copies/ul、10-1 稀释度样品 46977.73704 copies/ul、10-2稀释度样品 2600.292913 copies/ul。轮状病毒滴度是 TCIDs0=10-56/0.1ml。马蹄香提取物、百秋李醇、DMSO和利巴韦林对MA104细胞最大无毒浓度分别是1.17mg/ml、15.63ug/ml、0.5%和0.12mg/ml。利巴韦林组和马蹄香提取物组均具有阻碍轮状病毒吸附的作用,差异具有统计学意义(P均<0.05),百秋李醇组有阻碍轮状病毒吸附的作用,但差异没有统计学意义(P>0.05),马蹄香提取物组阻碍轮状病毒吸附的作用强于利巴韦林组,差异具有统计学意义(P<0.05)。利巴韦林组、马蹄香提取物组和百秋李醇组均具有直接杀死轮状病毒的作用,但差异没有统计学意义(P>0.05)。利巴韦林组、马蹄香提取物组和百秋李醇组均具有抑制轮状病毒增殖的作用,具有统计学意义(P均<0.05),马蹄香提取物组抑制轮状病毒增殖的作用强于百秋李醇组,差异有统计学意义(P<0.05)利巴韦林组抑制轮状病毒增殖的作用强于百秋李醇组,差异有统计学意义(P<0.05);马蹄香提取物组的抑制轮状病毒增殖作用强于利巴韦林组,但差异没有统计学意义(P>0.05)。[结 论]基于轮状病毒VP6基因构建的标准品质粒特异性和灵敏度高,适用于对轮状病毒拷贝数进行绝对定量。马蹄香提取物可阻碍轮状病毒的吸附和抑制轮状病毒的增殖,百秋李醇可发挥抑制轮状病毒增殖作用。