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以大花蕙兰杂交品种“华尔兹”的茎尖和茎节为外植体，系统地进行了其组织培养关键技术研究，建立了大花蕙兰离体快速繁殖的技术体系，对于快速推广大花蕙兰新品种具有实践意义和市场价值。研究结果表明：1．大花蕙兰外植体经冲洗后用75％乙醇处理30s，再用0.1％HgCl2灭菌12min，可获得比较好的灭菌效果，外植体成活率达66.7％，有效启动率为58.3％。2．试验中分别在培养基中加入0.6g／L活性炭、0.6g／L聚乙烯吡咯烷酮、100g／L香蕉泥，结果表明：0.6g／L活性炭抑制培养物褐化效果最佳，培养30d后褐变死亡率为19.1％，成活率达81.9％。3．大花蕙兰茎尖和茎节诱导无菌芽的适宜培养基是MS+BA 4.0mg／L+NAA 0.2 mg／L+AC 0.6 g／L，茎尖诱导芽的效果优于茎节段，诱导率分别为71.4％和57.1％。4．诱导大花蕙兰丛生芽的适宜培养基为MS+BA4.0 mg／L+NAA0.2mg／L+CH1.0 g／L+AC0.3 mg／L，诱导率为41.7％，丛芽增殖的适宜培养基为MS+BA2.0 mg／L+NAA0.2 mg／L+CH1.0 mg／L+AC0.3 mg／L，增殖系数可达3.79。5．诱导原球茎的适宜培养基为MS+BA1～2.0 mg／L+NAA0.2 mg／L+CH1.0g／L+AC0.3 g／L，原球茎的增殖与分化同时进行的适宜培养基为MS+BA1.0mg／L+NAA0.2 mg／L，增殖系数达6.1，分化率达71.1％。6．原球茎继代培养过程中，以纵切方式切割对原球茎的生长与增殖有利，继代周期以45d左右为宜。7．大花蕙兰壮苗生根的适宜培养基为MS+NAA0.5 mg／L+AC0.3g／L+Met0.2 mg／L，生根率达100％。8．试管苗移栽前应炼苗，移栽时洗净试管苗基部培养基，移栽后覆盖塑料膜（湿度控制在80％左右），成活率可达95％。