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本试验设计九个精料梯度的配方日粮(30:70、35:65、40:60、45:55、50:50、55:45、60:40、70:30、100:0)饲喂干乳期成年荷斯坦奶牛(502±25kg),对奶牛瘤胃液中的部分需氧和兼性厌氧菌进行了人工分离、PCR-16S rDNA分析和动态检测,同时还对奶牛血清中的部分常量元素和微量元素含量进行了检测,探讨了不同精料日粮水平对奶牛瘤胃内部分细菌和矿物质元素代谢的影响,并筛选出了适应高精料日粮条件下奶牛微生态制剂的备选菌种。试验结果如下:1以奶牛瘤胃液为原料,用人工培养基共分离到56株细菌,并对7株具代表性的细菌进行了PCR扩增,经序列同源性比较,最终把所分离的7株细菌鉴定为牛链球菌(A0625、A1212、0131)、蜡样芽孢杆菌(0113)、地衣芽孢杆菌(0091)、短小芽孢杆菌(0083)和嗜热链球菌(0123)。同时还发现随精料浓度的增加,牛链球菌、芽孢杆菌和嗜热链球菌的数量均呈不同程度的上升趋势,其中牛链球菌在30-45%组组间差异不显著(P>0.05),50-100%组组间差异显著(P<0.05),且与30-45%组相比也有显著差异(P<0.05);嗜热链球菌30-55%组组间差异显著(P<0.05),55-70%组组间差异不显著(P>0.05),100%组与其它各组相比均差异显著(P<0.05);芽孢杆菌30-40%组组间差异不显著(P>0.05),但45-100%组组间均差异显著(P<0.05)。试验结果表明不同精料水平的日粮对奶牛瘤胃中的需氧及兼性厌氧菌有着不同程度影响,其中对牛链球菌影响最大,从系统发育分析可知所分离细菌虽没有形成新的细菌进化枝,但牛链球菌和嗜热链球菌的核苷酸序列仍发生了多处碱基突变。2随精料浓度的增加,血清Zn、Cu、Fe、Ca和Mg的浓度分别以50%和55%组为拐点呈先升高后降低的趋势,其中血清Cu、Fe、Mg和Ca在55%组的浓度显著高于30%和35%组(P<0.05),与其它各组差异不显著(P>0.05);血清Zn50%组的浓度与55%组差异不显著(P>0.05),但与其它组相比差异显著(P<0.05);血清P和血清Mn、K的浓度分别以50%和55%组为拐点呈先下降后上升趋势,其中血清Mn、K于55%组的浓度显著高于30%、35%、40%组(P<0.05),与60%、70%、100%组相比,血清Mn的浓度变化差异显著(P<0.05),而血清K的浓度变化差异不显著(P>0.05),血清P的浓度在100%组显著高于其它各组(P<0.05),其余各日粮组组间差异不显著(P>0.05);血清Na的浓度一直呈上升趋势,55%、60%、70%、100%组显著高于30%、35%、40%、45%组(P<0.05),且55%、60%,70%、100%组组间差异显著(P<0.05),30%、35%、40%、45%、50%组组间差异不显著(P>0.05)。试验结果表明不同精料水平的日粮对奶牛血清中矿物质元素的浓度有着不同程度影响,其中对常量元素Ca、Mg、K和微量元素Mn、Zn的血清浓度影响最大。3本研究直接从饲喂不同精料日粮的奶牛瘤胃中分离到蜡样芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌,它们均可作为奶牛微生态制剂的备选菌株。