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1型纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)是体内主要的血浆纤溶活性抑制剂,调节和维持纤溶系统与凝血系统的动态平衡。血浆PAI-1水平的升高与许多血栓性疾病,如动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗死、脑梗塞等密切相关。过氧化体增殖物激活型受体α(peroxisome proliferator-activated receptors alpha,PPARα)是一类由配体激活的核转录因子,具有多种生物学效应,在机体生理和病理过程中具有多方面的重要功能。非诺贝特和亚油酸分别为PPARα的外源性、内源性特异性激活物,但二者对PPARα的影响以及在PAI-1基因转录调控中的作用及其机制尚不十分明确,本课题采用分子生物学和细胞生物学方法就此做了相关研究,共分为以下三个部分: 一、PPARα的不同激活物对HepG2细胞PAI-1和PPARα表达的影响 目的:观察不同的PPARα激活物非诺贝特和亚油酸在HepG2细胞调控PAI-1和PPARα表达中发挥的作用。方法:体外培养HepG2细胞,采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测不同浓度非诺贝特和亚油酸诱导下PAI-1和PPARα mRNA水平。结果:1.非诺贝特能够显著降低HepG2细胞中PAI-1 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01),而亚油酸可以显著增加PAI-1mRNA的表达(P<0.05或P<0.01),二者均呈一定的剂量相关性。2.非诺贝特和亚油酸均可显著增加HepG2细胞中PPARα mRNA水平(P<0.05或P<0.01),并且也表现出一定的剂量相关性。结论:非诺贝特和亚油酸对HepG2细胞中PPARα的影响可以体现在增加其mRNA水平上,并且可以从转录水平调节PAI-1的合成,这种作用可能与非诺贝特和亚油酸激活PPARα参与PAI-1的基因表达调控有关。同为PPARα的特异性激活物,对PAI-1的影响却截然相反,提示非诺贝特和亚油酸对PAI-1的转录调控除PPAR α作用途径外,可能还存在其他的调节途径。 二、PPARα的不同激活物对HepG2细胞PAI-1表达影响的机制初探 目的:探讨非诺贝特和亚油酸影响PAI-1表达与PAI-1启动子的关系及