背景:随着高通量测序技术的产生和生物信息学的发展,越来越多的ncRNA被人们所关注并且被证实其在人类疾病调控中扮演重要角色。环型RNA(CircRNA)属于ncRNA的一种,它与相同的线性分子相比结构更加稳定。CircRNA可以作为mircoRNA(miRNA)分子海绵,即通过吸附miRNA来间接调控下游基因的表达。其次它可以调控核内RNA的转录以及翻译蛋白等作用。除了一些内源性的CircRNAs外,有些科研工作者利用miRNA对某些癌症的影响,在miRNA数据库中,找出它的核苷酸序列,然后利用这些miRNA的互补核苷酸序列设计出SCircRNA,发现这些合成的CircRNA可以像内源性CircRNAs有相似的生物学功能。目的:将人工构建的SCircRNA质粒转染宫颈癌细胞(Hela)和人眼脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1),研究SCircRNA在Hela和OCM-1细胞中过表达后,对其增殖、迁移、侵袭以及对细胞周期和凋亡的有影响;通过双荧光素酶和Western blot技术进一步探讨SCircRNA是否能充当分子海绵进而调控下游把基因表达为未来环形RNA作为新型靶点应用于疾病治疗奠定理论基础。方法:将人工合成的SCircRNA重组质粒转染Hela和OCM-1,提取RNA做RT-PCR,然后利用设计的内扩和外扩引物验证SCircRNA在Hela和OCM-1细胞中是否表达成功且成环。构建过表达细胞模型并通过MTT、Transwell细胞迁移和侵袭试验、流式分析等技术研究过表达SCircRNA对癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等生物学功能的影响。构建双荧光素酶系统研究重组质粒与miR-17、miR-19、miR-141是否有相互作用;Western blot验证SCircRNA作用的下游靶基因及相关的信号通路,探讨其调控机制。结果:首先成功构建并表达人工环形RNA分子SCircRNA;过表达SCircRNA后Hela和OCM-1细胞增殖、迁移和侵袭能力显著高于它的空载体组和空白对照组;流式细胞检测结果显示,SCircRNA能够促进Hela和OCM-1的细胞周期进程,抑制凋亡;将构建好的双荧光素酶质粒pcd-mir-SCircRNA分别和NC,miR-17,miR-19,miR-141共转染,结果发现共转染组荧光值显著低于共转染NC组,然后分别再给pcd-mir-SCircRNA与之前3个miRNA共转染组中再共转染SCircRNA质粒则该组与共转染miRNA组相比荧光值显著增高;Western blot结果显示,SCircRNA可以显著降低细胞中PTEN蛋白的表达,而显著增加AKT、p-AKT和p-mTOR的蛋白表达水平。结论:SCircRNA可以下调PTEN的表达,进而影响/Akt/PI3K/mTOR信号通路,促进Hela和OCM-1细胞的恶性表型。