犬小孢子菌(Microsporum canis)归属于半知菌亚门-丝孢菌纲-丝孢菌目-丛梗孢科-小孢子菌属,为发外型亲动物型皮肤癣菌,存在于自然界及猫,狗,兔等动物毛皮上,可通过动物—动物,动物—人的途径传染。研究表明,犬小孢子菌可导致头癣,体癣和少数甲癣以及个别少见真菌病,一直是导致国内外浅部真菌病特别是头癣的重要病原菌。近年来,随着人们生活水平的提高和饲养宠物之风的盛行,头癣的发病率居高不下。而犬小孢子菌作为头癣中白癣和脓癣的主要致病菌,对头癣感染及传染起着重要的作用。而且,犬小孢子菌传染性强,在一定条件下还可在特定人群中出现暴发及引发泛发性浅部真菌病。综上所述可见对其研究的必要性。目的:1.分析本地犬小孢子菌致病情况。2.探讨使用分子生物学技术鉴定皮肤癣菌的特异性和敏感性,以便在犬小孢子菌所致的真菌性疾病的鉴定中推广应用。3.观察5种常用抗菌药物抗菌效果,进而为临床犬小孢子菌所致疾病(头癣、体癣)的用药提供理论依据。方法:2007年7月～2007年12月,对兰州大学第二医院皮肤科门诊拟诊为犬小孢子菌(头癣及有可疑动物接触史的体癣)感染的患者,分别取其断发、头屑或皮屑做15%KOH直接涂片镜检。采用调查问卷的方式,详细登记培养结果为犬小孢子菌患者的相关临床资料。对阳性标本行沙堡葡萄糖琼脂及米饭培养基分离培养、鉴定菌种。采用真菌通用引物ITS1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)、ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)对犬小孢子菌rDNA的ITS区进行PCR扩增,从而从分子水平鉴定到犬小孢子菌种的水平。对基因组DNA采用限制性片段长度多态性(RFLP)分析,用HinfⅠ、TaqⅠ两种限制性内切酶对ITS1、ITS4的扩增产物进行酶切并对酶切结果进行分析。采用美国临床和实验室标准化研究所(clinical and laboratorystandardinstitute,CLSI,即原NCCLS)于2003年发表的针对产孢丰富丝状真菌的微量稀释法(M-38A)测定犬小孢子菌对临床5种抗真菌药物的MIC值。结果:1.55例犬小孢子菌感染患者,表现为头癣者47例(85.45%),体癣者8例(14.55%)。年龄1～47岁,其中10岁以下者52例(94.54%),男40例(72.72%),女15例(27.27%)。家住城市者42例(76.36%),地县及农村者13例(23.63%),49例(84.09%)有2周到1年半不等的动物(猫狗马兔)接触史,8例(14.55%)例有与头癣患者接触史,亲兄弟,表兄妹同时感染头癣各1例。2.引物ITS1、ITS4在犬小孢子菌均扩增出一约760bp特异性条带。3.HinfI、TaqⅠ各将犬小孢子菌切出两条固定条带。4.抗真菌药物的MIC范围如下,伊曲康唑0.25-1μg/ml,益康唑0.25-2μg/ml,特比萘芬0.01-0.04μg/ml,灰黄霉素0.25-1μg/ml,氟康唑1-32μg/ml。结论:1.调查的犬小孢子菌感染以10岁以下儿童为主,主要表现为头癣中的白癣,并有家族内传染的情况。2.引物ITS1、ITS4可以把犬小孢子菌特异地鉴定到种的水平,从而使临床快速鉴定该菌成为可能。3.内切酶HinfⅠ和TaqⅠ可以特异地鉴定犬小孢子菌。4.犬小孢子菌对5种药物敏感,各种药物的最小抑菌浓(minimal inhibitory concentration MIC)之间有显著性差异,并为临床用药提供了有益参考。