百合珠芽和鳞茎中活性成分的分离纯化、LC-ESI-MS/MS鉴定及抗氧化活性研究

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百合(Lilium brownii var. viridulum)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生草本植物,其营养丰富,富含多种氨基酸和矿物质元素,同时还含有黄酮、多酚、生物碱和皂苷等活性成分,具有抗氧化、调节免疫和抗肿瘤等活性。百合在我国资源丰富,鳞茎是百合常用的食用和药用器官;珠芽是百合地上茎叶腋间产生的气生鳞茎,是营养生长中产生的繁殖器官。目前,关于百合鳞茎的研究较多,而珠芽研究较少。因此,本文对百合珠芽和鳞茎的营养成分及活性成分(总黄酮、总多酚、总生物碱和总皂苷)进行分析和比较;通过溶剂萃取、AB-8大孔树脂吸附和硅胶柱纯化技术对百合珠芽和鳞茎中的总黄酮、总多酚和总生物碱进行纯化,采用 HPLC-ESI-MS/MS鉴定其粗提物和各纯化组分的成分;对总黄酮和总多酚的抗氧化活性进行研究,以期为百合珠芽的开发与应用提供基础。本文主要研究结果如下:  1.百合珠芽和鳞茎的营养成分和活性成分分析。营养成分分析表明,与百合鳞茎相比,百合珠芽中粗纤维含量显著升高,粗脂肪含量显著降低(p<0.05),而总糖和粗蛋白含量无显著性差异。珠芽常量元素中Ca和Mg含量显著升高,而P和S含量显著降低(p<0.05);珠芽微量元素中Fe、Cu和Se含量显著升高,而Al、Mn、Cr、B和 Ni元素含量显著降低(p<0.05);珠芽重金属元素中 Pb、Cd和Hg元素含量显著降低(p<0.05)。珠芽中必须氨基酸总量(EAA)占总氨基酸含量(TAA)比值为33.67%,显著高于鳞茎(25.56%)(p<0.05),符合理想蛋白模式。活性成分分析表明,除生物碱外,百合珠芽的活性成分含量均高于百合鳞茎,二者均以总酚和总黄酮较高。可见,百合珠芽具有重要的开发价值与应用前景。  2.百合珠芽和鳞茎中总黄酮、总酚和总生物碱的纯化及 LC-ESI-MS鉴定。百合珠芽和鳞茎中共鉴定出21种黄酮类化合物;其中山奈酚、儿茶素、异鼠李素-半乳糖苷、异鼠李素-木糖苷、柚皮素-半乳糖苷、槲皮素-半乳糖苷、芦丁、山奈酚-乙酰基鼠李糖苷、槲皮素-鼠李糖基-阿拉伯糖苷、槲皮素-乙酰基葡萄糖苷、山奈酚-半乳糖-鼠李糖苷、槲皮素-鼠李糖苷、山奈酚-鼠李糖基-葡萄糖苷、查耳酮、杨梅素和桔皮素为首次在百合珠芽中报道,异鼠李素-木糖苷、异鼠李素-葡萄糖苷、山奈酚-乙酰基鼠李糖苷和根皮素为首次在百合鳞茎中报道。百合珠芽和鳞茎中共鉴定出21种多酚类化合物;其中为没食子酸、绿原酸、羟基苯甲酸、香草酸、异鼠李素-半乳糖苷、阿魏酰-香豆酰基甘油酯、香豆酰基甘油酯、阿魏酰基甘油酯、阿魏酸、咖啡酰基-香豆酰基甘油酯、异鼠李素-木糖苷、山奈酚、芥子酸、芥子酸-葡萄糖苷、槲皮素-半乳糖苷、香豆酰基-葡萄糖甘油酯和山奈酚-鼠李糖基-葡萄糖苷为首次在百合珠芽中报道,芹菜素-葡萄糖基-木糖苷、山奈酚-乙酰基鼠李糖苷、槲皮素-乙酰基葡萄糖苷和芥子酸-葡萄糖苷为首次在百合鳞茎中报道。百合珠芽和鳞茎中共鉴定出10种生物碱类化合物;其中小檗碱、莨菪碱、秋水仙碱、野百合碱、黄连碱、盐酸巴马汀和金黄紫堇碱为首次在百合珠芽中报道,苦参碱、盐酸石蒜碱、莨菪碱和药根碱为首次在百合鳞茎中报道。  3.百合珠芽和鳞茎中总多酚和总黄酮的体外抗氧化活性研究。百合珠芽和鳞茎总多酚及总黄酮提取物均具有较好的抗氧化活性,珠芽总多酚和总黄酮清除DPPH·能力均高于鳞茎,在500μg/mL时对DPPH·清除率分别为64.90%和56.48%;鳞茎总多酚和总黄酮清除ABTS+·能力均高于珠芽,在500μg/mL时对ABTS+·清除率分别为95.51%和93.59%;百合珠芽和鳞茎总多酚及总黄酮螯合Fe2+能力相近。
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