包疮叶[Maesa indica (Roxb.) A. DC.]系紫金牛科(Mysinaceae)杜茎山属植物,主要分布在中国、印度、越南等地,国内主产于云南南部地区。我国民间将该植物用于治疗癌症,我们经流式细胞术活性筛选也发现包疮叶的含水醇提物具有细胞周期抑制活性。但该植物的抗肿瘤成分以及相关活性至今未见研究报道,因此,本论文对其化学成分及其活性进行了研究。微量快速预实验结果表明:80%含水乙醇适合作提取溶剂;经液液萃取分离,可通过用乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到含水乙醇提取物的G2/M期抑制活性部位。据此,包疮叶茎皮粉末(4.5 kg)用80%乙醇室温浸提,减压回收乙醇至无醇味,依次用等量乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到了有活性的乙酸乙酯萃取物48 g和正丁醇萃取物260 g。本论文着重对乙酸乙酯萃取物的活性成分进行了研究,同时对正丁醇萃取物中皂苷类成分也进行了分离和纯化,从而得到了较纯的包疮叶总皂苷,并对其抗肿瘤活性作了初步评价。乙酸乙酯萃取物用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱和制备薄层色谱进行分离,从中得到了化合物1~7 (见Fig 1)。化学结构用现代波谱学方法进行研究,并将这些化合物分别鉴定为:7,22-二烯-3β-羟基豆甾烷(1)、β-谷甾醇(2)、正十六烷酸(3)、杜茎山酚(4)、大黄酚(5)、1’-正十六烷酸甘油酯(6)和1’-(9顺,12顺)-十八碳二烯酸甘油酯(7)。采用SRB法结合细胞形态学检测的方法,对化合物1~7以及包疮叶总皂苷对人白血病K562细胞的抗肿瘤活性进行了初步评价。结果表明:化合物3~7和包疮叶总皂苷对K562细胞具有细胞凋亡诱导以及细胞增殖抑制等抗肿瘤活性。综上,本论文从包疮叶茎皮中分离鉴定了7个化合物,并经实验初步证实,其中5个化合物3~7具有抑制人癌细胞K562增殖的抗肿瘤活性。同时,经对该植物皂苷成分的初步分离和活性测试,初步证实皂苷为该植物的另一类重要的抗肿瘤活性成分。在化合物1~7中,3和5~7为首次从包疮叶以及杜茎山属植物中分到,4和7的抗肿瘤活性为本研究首次测试发现。本论文上述研究结果首次阐明了包疮叶的5个抗肿瘤活性成分以及总皂苷的抗肿瘤活性,为包疮叶在民间的抗肿瘤应用提供了初步的实验依据,也为进一步深入研究其皂苷类抗肿瘤活性成分奠定了基础。