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墨吉明对虾(Fenneropenaeus merguiensis)蜕皮抑制激素(molt-inhibiting hormone,MIH),属于甲壳动物高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)家族神经肽,由眼柄神经内分泌调控中心X器官-窦腺复合体(X-organ-sinus-gland,XO-SG)合成分泌。蜕皮抑制激素和蜕皮类固醇激素(molting hormone,MH)相互拮抗而调控蜕皮活动,并且其在甲壳动物的生长、繁殖和渗透压调节等一系列活动中发挥重要作用。近年来,随着墨吉明对虾遗传育种工作的开展,因此对其生长、繁殖、蜕皮等相关基因的克隆、表达及功能研究意义重大。本研究利用RT-PCR和RACE技术首次克隆获得墨吉明对虾蜕皮抑制激素MIH1的cDNA、gDNA全长并对其进行生物学特性描述;运用实时荧光定量PCR技术检测了MIH1基因在墨吉明对虾不同组织、不同蜕皮时期的表达分布;同时运用原核重组表达技术成功获得FmMIH1重组蛋白,注射FmMIH1重组蛋白和双链对MIH1进行功能研究。FmMIH1拥有二型眼柄神经肽CHH/MIH/GIH家庭的大部分特征。FmMIH1开放阅读框(ORF)大小为318 bp,编码105个氨基酸残基。FmMIH1成熟肽由76个氨基酸残基组成,第11位的甘氨酸残基和6个半胱氨酸残基位于成熟肽的保存位置。FmMIH1基因由2个内含子和3个外显子组成。同源性分析表明Fm MIH1在功能结构域上较为保守,与斑节对虾MIH1、凡纳滨对虾MIH1同源性最高(99%、98%)。系统发育分析结果也表明FmMIH1与甲壳动物长尾类聚为一支,其中与斑节对虾MIH1,凡纳滨对虾MIH1亲缘关系最近。除了眼柄,在肠道中也可以检测到FmMIH1高水平表达。FmMIH1在整个蜕皮后期、蜕皮间期的早期、中期阶段和蜕皮前期的表达水平很低;但在蜕皮间期(C3)检测到FmMIH1表达水平大幅增加。对于功能研究实验,RNA干扰结果显示,注射dsFmMIH1的实验虾,其蜕皮周期明显缩短了2.7天(P<0.05);意料之外的是,注射Fm MIH1重组蛋白的实验虾,其蜕皮周期也平均缩短了1.8天(P<0.05)。因此推测该重组蛋白可能是生物惰性蛋白,这部分结构与内源MIH1竞争性结合其运输蛋白,因此减少了能够到达靶位点的生物活性MIH1。总之,这项研究结果为我们进一步研究甲壳动物的蜕皮、生长提供新的见解。