黄芪主要化学成分制备及含量测定方法研究

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本课题主要通过色谱学和波谱学技术对黄芪中的主要化学成分进行分离纯化和结构鉴定,并应用HPLC-PDAD-ELSD建立了含量测定的方法,分析主要化学成分在黄芪中的含量,论文中还对黄芪甲苷的提取工艺进行了探讨。目的蒙古黄芪Astragalus membranaceus Bunge var.mongolicus(Bunge)Hsiao为豆科(Leguminosae)黄芪属(Astragalus)植物,是我国传统中药。性甘,微温,归脾、肺经,具有补气固表,利尿托毒,排脓,敛疮生肌之功效。从黄芪中分离得到的化合物,主要有皂苷类,黄酮类类,联苯衍生物,多糖等,现代药理学研究表明,黄芪的生物活性成分,以皂苷类,黄酮类最为重要。目前对黄芪质量评价研究主要集中在指纹图谱的研究上,对黄芪活性成分的含量测定研究主要集中在黄芪甲苷的研究。黄芪中生物活性成分多样除了皂苷成分外黄芪黄酮类成分也具有显著的生物活性,单一活性成分的含量不能够反应黄芪的生物活性的全貌。为了对中药黄芪质量评价提供可靠的方法;也为指导临床合理用药提供依据,我们对黄芪中的主要活性成分进行制备,并以其作为对照品进行多活性组分含量测定。方法采用现代色谱学技术包括硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱、活性炭柱、制备液相等对黄芪提取物的正丁醇部分进行分离,单体成分采用波谱学手段鉴定。论文中以黄芪中6种主要生物活性成份为对照品,其中两种黄芪皂苷成分,包括黄芪甲苷(5)和黄芪皂苷Ⅱ(6);四种黄芪黄酮成分,包括紫檀烷型黄酮-3葡萄糖苷(1),3’-羟基-5’-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),7-羟基-4’-甲氧基异黄酮(12),7,3’-羟基-5’甲氧基异黄酮(13),应用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-PDAD-ELSD)联用技术,建立含量测定方法。结果与结论得出化合物13个,分别是:紫檀烷型黄酮-3葡萄糖苷(1),异黄烷-7葡萄糖苷(2),3’-羟基-5’-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),4’-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)黄芪甲苷(5)黄芪皂苷Ⅱ(6),β-谷甾醇(7),十六烷酸(8),胡萝卜苷(9)腺嘌呤核苷(10),蔗糖(11),7-羟基-4’-甲氧基异黄酮(12),7,3’-羟基-5’甲氧基异黄酮(13)。论文中分别考察了6种主要成份在蒙古黄芪和膜荚黄芪中的含量差异,结果显示化合物13和6没有显著性差异,其他均有显著性差异。其中,膜荚黄芪中的化合物5,3,1均高于蒙古黄芪,蒙芪的化合物12高于膜荚黄芪。论文中还对黄芪甲苷的提取工艺进行深入研究,黄芪甲苷的转移率0.2%。
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