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目的本研究内容是国家“十一五”重大新药创制专项“名优中药大品种气滞胃痛颗粒技术改造”课题的一部分。气滞胃痛颗粒为市场上治疗胃病疗效确切、社会反响良好的传统中药大品种,本课题所研究的中药白芍即为气滞胃痛颗粒的组方药材之一,采用化学物质组学研究模式及经典的色谱及光谱技术对白芍药材对镇痛、抗炎、抗溃疡有效物质组指认研究,确定白芍抗炎镇痛的有效化学物质组;确立先进可行的有效化学物质组制备、纯化工艺路线;建立指纹图谱与有效成分定量相结合的质量控制体系;采用以药物活性成分为指标的指纹峰归属与药效之间谱效相关性研究;并结合体内药效学实验,测定疾病发生时及药物作用后动物体内部分内源性物质的变化,初步探讨白芍抗炎镇痛、抗溃疡药物作用机制。方法1.采用高效液相色谱法,进行L9（34）正交试验,以芍药苷、白芍总苷、出膏率为指标,对白芍总苷进行提取工艺优选研究。2.采用乙醇梯度处理和树脂联用技术,对白芍总苷进行纯化工艺研究。3.采用高效液相色谱法,以芍药苷和白芍总苷为指标,开展白芍的质量控制标准研究。4.采用高效液相色谱法,对10个不同来源批次的白芍药材进行指纹图谱考察,开展白芍药材的指纹图谱质量控制方法研究;结合气滞胃痛颗粒复方指纹图谱、白芍总苷富集物指纹图谱及其药理学效应,开展以药物活性成分为指标的指纹峰归属与药效之间谱效相关性研究。5.通过建立醋酸致痛大鼠、福尔马林致痛小鼠模型,对纯化后的白芍总苷进行镇痛药效学评价研究。6.通过试剂盒检测对不同组别大鼠血清内内源性物质cAMP、cGMP、PGE2含量,对白芍总苷进行药物体内抗炎镇痛作用研究。7.建立大鼠无水乙醇型胃黏膜损伤模型,分别采用传统方法与灰度评价法,对纯化后的白芍总苷进行抗溃疡药效学评价。8.通过制备石蜡切片,HE染色,对各组大鼠胃组织进行病理学观察及检测。9.通过试剂盒检测对不同组别大鼠血清内内源性物质PGE2、SOD、MDA含量进行分析,对白芍总苷进行药物体内抗溃疡作用研究。结果1.通过药理药效实验,确定白芍有效物质组白芍总苷,并确立白芍总苷制备,纯化工艺通过L9（34）正交试验,采用高效液相色谱法,以芍药苷、白芍总苷、出膏率为指标,确定白芍总苷的最佳提取工艺为A1B2C3,即选用6倍量50%乙醇回流提取3次,2 h/次为最佳提取工艺。通过乙醇梯度处理和树脂联用技术筛选出了对白芍总苷吸附较好的HPD100型大孔吸附树脂,并确立白芍总苷最佳纯化工艺为:浓度1 g生药/mL的药液用95%乙醇沉至90%,冷藏10 h;采用HPD100树脂,湿法装柱,将醇沉样品溶液制成水溶液,以药材树脂用量比2∶1（2 g药材∶1 mL湿树脂）上柱,以5倍量50%乙醇洗脱,收集洗脱液5 BV,水浴蒸干,即得白芍总苷富集物。富集到的白芍总苷纯度达83.05%。2.通过高效液相色谱法,以白芍总苷和芍药苷为指标,完成白芍有效物质组白芍总苷定量方法研究,建立了以白芍物质组为基础的白芍药材质量控制标准。3.通过白芍药材的指纹图谱质量控制方法研究,结合气滞胃痛颗粒复方指纹图谱、白芍总苷富集物指纹图谱及其药理学效应,初步探讨以药物活性成分为指标的指纹峰归属与药效之间谱效相关性研究。采用高效液相色谱法,对10个不同来源批次的白芍药材进行指纹图谱考察,建立了十产地白芍药材的指纹图谱,标定十个共有峰,结合气滞胃痛颗粒复方指纹图谱、白芍总苷富集物指纹图谱,通过保留时间和光谱验证,指认出5个峰为气滞胃痛颗粒复方及白芍总苷富集物共有峰,结合其药理学效应,初步推断白芍是为气滞胃痛颗粒中起抗炎镇痛效果的主要有效成分。4.通过福尔马林致小鼠疼痛实验和冰醋酸致大鼠疼痛实验研究,结合药效评价指标和测定疾病发生时及药物作用后动物体内部分内源性物质的变化,初步推断白芍有效物质组白芍总苷抗炎镇痛作用机制为抑制体内炎性介质PGE2含量的升高,增加第二信使cAMP的含量而发挥作用。福尔马林致小鼠疼痛实验中,预防性给药结果显示,各组均有抑制福尔马林直接刺激外周神经末梢引起的疼痛并且既能抑制外周神经末梢传导而减轻疼痛,又能抑制继发的炎性反应所导致的疼痛,各组足肿胀度抑制率均可达到50%以上。福尔马林致痛小鼠治疗性给药结果显示,模型组小鼠后足肿胀恢复期为15天,白芍总苷为9天,气滞胃痛、阿司匹林及可待因均为8天。冰醋酸致大鼠扭体反应抑制率,与模型组比较,组间均有显著性差异,各组扭体抑制率均大于45%,白芍总苷组抑制率大于50%,可待因组抑制率可达到70%醋酸扭体法致痛对大鼠体内cAMP含量测定结果:与空白组比较,模型组cAMP含量降低,给药各组cAMP含量与空白组无显著性差异,与模型组比较,给药组与模型组cAMP含量有显著性差异,表明冰醋酸致大鼠疼痛使大鼠体内cAMP含量下降,给药组具有抑制cAMP含量下降的作用。醋酸扭体法致痛对大鼠体内cGMP含量测定结果:与空白组比较,模型组在腹腔注射冰醋酸后cGMP含量显著下降,表明冰醋酸致大鼠疼痛可使cGMP含量降低,各组与模型组比较均无显著性差异且cGMP含量接近模型组含量。醋酸扭体法致痛对大鼠体内PGE2含量测定结果:与空白组比较,模型组PGE2含量显著升高,阿司匹林组与模型组比较无显著性差异,其它各组与模型组比较均存在显著性差异。5.通过大鼠无水乙醇型胃黏膜损伤研究,结合药效评价指标和测定疾病发生时及药物作用后动物体内部分内源性物质的变化,初步推断白芍中白芍总苷并非以抑制分泌清除自由基等方式发挥抗溃疡作用,可能以其他方式发挥抗溃疡作用或作用较低。溃疡指数结果显示,与模型组比较,气滞胃痛、奥美拉唑组动物的溃疡指数明显减少,抑制率较高,结果具有统计学意义（p<0.01）;雷尼替丁、胶体果胶铋组也有一定的抑制作用,但无显著性差异;白芍总苷组抑制率不佳。病理切片结果显示,气滞胃痛、奥美拉唑组与模型组比较具有显著性差异（p<0.05）,与空白组无差异,白芍总苷组无显著性差异。大鼠无水乙醇型胃溃疡模型血清PGE2含量测定结果:奥美拉唑、气滞胃痛、胶体果胶铋组含量,与模型组比较有显著差异（p<0.01）,白芍总苷组无显著性差异。大鼠无水乙醇型胃溃疡模型血清SOD含量测定结果:奥美拉唑、气滞胃痛、胶体果胶铋、雷尼替丁组含量,与模型组比较有显著差异（p<0.01）,白芍总苷组无显著性差异。大鼠无水乙醇型胃溃疡模型血清MDA含量测定结果:奥美拉唑、气滞胃痛、胶体果胶铋组含量,与模型组比较有显著差异（p<0.01） ,白芍总苷组无显著性差异。