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威廉姆斯瘤基因1（Wilms tumour gene1, WT1）是第一个被发现与威廉姆斯瘤相关的基因，近期的研究证实该基因对肾脏的发生及性腺的生成起到极其重要的作用。此外，WT1在子宫、脾脏、肝脏等器官，肌肉系统，胸腔和腹腔中器官的间皮细胞中均有表达，这说明WT1在调控各个组织器官的生长发育中都起着重要的作用。WT1在哺乳动物的卵巢和颗粒细胞中均有表达，并且在调节卵巢的发育及卵泡大小等方面起着重要的作用。然而，对于WT1在哺乳动物卵母细胞及早期胚胎中的表达及功能方面的相关报道较少。猪是我国重要的肉用家畜，并且在解剖结构和生理代谢方面与人类十分接近，可以作为人类重要的疾病模型。因此，本实验首先对获得猪早期胚胎的方法进行比较，进而筛选出优质的早期胚胎作为研究对象，随后检测WT1在卵母细胞成熟和早期胚胎发育中的作用。研究结果表明（1）percoll双层法离心得到的猪精子在顶体获能、活力、活率等方面较好；体外受精（IVF）和胞质内精子注射（ICSI）方法的比较中，发现通过ICSI方法获得的胚胎单精受精率高于IVF胚胎，所以我们选用ICSI早期胚胎作为检测WT1表达及功能的实验对象；（2）经RT-PCR和荧光定量PCR检测到WT1mRNA分别在猪卵母细胞和ICSI早期胚胎中表达；免疫荧光染色检测到WT1蛋白在猪卵母细胞及ICSI早期胚胎胞质中的表达量较高；（3）在猪肾成纤维细胞中转染并筛选WT1-shRNA干扰序列，并将干扰效果较好的序列构建成pLV3-WT1shRNA慢病毒表达载体，向猪GV期卵母细胞周隙显微注射病毒，结果表明WT1基因表达受到抑制但WT1的下调并不影响猪卵母细胞的体外成熟；（4）用pLV3-WT1shRNA转染早期胚胎，经RT-PCR和荧光定量PCR检测发现WT1mRNA在早期胚胎中的含量明显下调，同时发现大量的早期胚胎发育停滞在八细胞和桑葚胚阶段，只有少部分的胚胎能够发育到囊胚阶段；并且在WT1下调组中带有坏死细胞的胚胎数也明显高于对照组；（5）用荧光定量PCR检测到WT1下调可导致抗凋亡基因BCL2的下调，而促凋亡基因BAX的表达上调；但对于重要的早期发育相关基因没有检测到明显的调节作用。