CdZnTeS量子点电致化学发光行为研究及其生物传感应用

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电致化学发光(ECL)因其背景信号低、成本低、灵敏度高、测试简单等优势而得到科研人员的青睐。二十一世纪以来,新型纳米材料——量子点(QDs)逐渐步入ECL的舞台。各种基于QDs的ECL传感器也相继被构建出来,其应用领域遍及医药、环境、能源、生物等方面。但是,基于QDs的ECL传感器在生物分析中的应用依旧存在很多问题,主要体现在以下三个方面:(1)普通QDs的ECL效率远不如传统的ECL发光试剂,因此,急需合成新的纳米材料来取代传统的ECL发光体在生物分析中的应用;(2)有关QDs ECL成像分析的报道非常少,所以,这是一个值得探索的模块,也是今后很长一段时间内需要重点探究的部分;(3)同时检测可以简化操作步骤、节约分析时间,因而需要设计出更多的方法实现多组分的同时检测以满足实际需要。基于此,本文基于QDs的ECL策略开展了一系列探究性实验用于肿瘤标志物的可视化分析及同时检测。本论文的主要内容包括以下三个部分:1.基于CdZnTeS QDs的ECL成像免疫分析在本章中,首先制备了CdZnTeS QDs,并详细研究了其ECL性质及ECL效率。通过以这种具有强ECL信号的CdZnTeS QDs为信号标记物,构建免疫传感器用于检测甲胎蛋白(AFP)和癌抗原125(CA125)。在最佳检测条件下,可以通过可视化的ECL成像分析AFP和CA125的浓度。在信噪比为3时,AFP和CA125的检测限分别为0.1ng/mL和6 U/mL。此外,通过光电倍增管(PMT)直接检测,可以获得更低的检测限,AFP和CA125的检测限分别为0.1 fg/mL和0.03 mU/mL。最后,使用商业酶联免疫吸附测定法(ELISA)对人血清样品中的AFP和CA125进行测定,测试结果表明,基于CdZnTeS QDs的ECL生物传感器具有快速生物医学筛查和临床诊断的应用潜力。2.基于CdZnTeS QDs的ECL免疫传感器用于AFP和CA125的同时检测以不同荧光发射且荧光互不干扰的CdZnTeS QDs分别标记AFP和CA125的二抗,Fe3O4@SiO2用于固载一抗,构建ECL免疫传感器用于同时测定肝癌细胞上的两种重要肿瘤标志物即AFP和CA125。在检测过程中,分别借助525 nm和650 nm的滤光片即可实现AFP和CA125的同时检测,检测限分别为3 pg/mL和0.1 U/mL。通过血清样分析,可知这种ECL免疫传感器具有可靠的实际应用能力。3.ECL免疫分析对于血小板减少综合征病毒的定量检测使用ECL技术首次实现了对血小板减少综合征病毒(SFTSV)的定量和灵敏检测。以Fe3O4@SiO2为磁传感平台,以CdZnTeS QDs为标记物,制备了夹心型免疫传感器。所构建的ECL免疫传感器对SFTSV具有良好的检测能力,检测限为0.003 fg/mL,是目前所报道的方法中检测限最低的一种定量方法。此外,SFTSV免疫传感器具有长期的稳定性、良好的重现性及较高的特异性。最后,对人血清中的SFTSV进行了分析,结果表明该ECL免疫传感器在临床诊断中具有广阔的应用前景。
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