甘露聚糖是细胞壁半纤维素的重要成分之一，而B一甘露聚糖酶(EC3．2．1．78)是分解甘露聚糖酶的主要酶类。B一甘露聚糖酶与禾本科种子的萌发过程相关，涉及到细胞壁的分解，包括胚乳和糊粉层细胞壁的降解。因此，进一步深入研究B一甘露聚糖酶的性质对研究其在禾本科种子的萌发过程中的作用机理具有重要意义。本文以水稻(OryzasativaL)品种“台中65”为材料，从萌发水稻种子中分离纯化p一甘露聚糖酶，并研究其酶学性质，为克隆水稻甘露聚糖酶基因奠定基础，此外，本文还探讨了恢复高温和SDS导致变性的p一甘露聚糖酶活性的方法。所得结果如下：通过硫酸铵分级沉淀、SephadexG-25凝胶过滤、CM一52离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤等方法进行分离纯化，得到纯化倍数为31．8的p一甘露聚糖酶蛋白。通过SDS和Triton-X对p一甘露聚糖酶的酶活性影响实验结果表明，SDS对p一甘露聚糖酶的酶活性有很大影响，而Triton-X对解除SDS造成的B一甘露聚糖酶失活有恢复作用。发现Triton-X对酶活性的恢复作用与恢复时间以及Triton-X的浓度成正比，并与SDS的浓度成反比。0．5％的Triton-X处理0．5h已经开始恢复0．5％的SDS导致失活的酶活性，但1％的SDS引起的失活必须要使用5％的Triton-X处理才可能部分恢复。高温(100℃)和低温(4~C)处理实验表明，水稻种子的p一甘露聚糖酶不耐高温，100~C处理30min后酶活性完全丧失。高温处理后进行6d的低温(4℃)处理可以部分恢复酶活性。进一步研究发现，p一甘露聚糖酶失活后酶蛋白聚集在絮状沉淀内，于复性过程中逐渐释放到上清液。通过对处理不同时间的酶液进行离心发现，上清液蛋白量的增加与酶活性的增大相对应，并在SDS-PAGE电泳后发现一种出现趋势与酶活性相吻合的蛋白。SDS-PAGE电泳后，将上述蛋白通过切割胶带、Triton-X梯度冲洗、研磨提取、透析、浓缩后收集等步骤，再次进行SDS-PAGE检测发现单一的蛋白带，通过IEF银染检测也发现条带单一，并可重新检测到酶活性，表明已经成功从SDS-PAGE中回收到p一甘露聚糖酶的纯酶蛋白，并恢复了该酶的活性。通过检测p一甘露聚糖酶的各种性质发现，水稻种子中p一甘露聚糖酶的分子量约为55kDa；40℃是该酶的最适反应温度；pH5．0的条件下，该酶的活性最大；不同金属离子对该酶活性影响差异很大，A矿、Hg2’强烈抑制该酶的活性并导致失活，而c矛’有较明显的激活作用。