论文部分内容阅读
目的:旨在从分离得到的三个没药环菠萝蜜烷类化合物(MY-1,MY-2和MY-3)中筛选出对前列腺癌PC-3细胞活性最强的化合物,并研究其诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的可能机制。 方法:采用氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、电喷雾质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)等方法鉴定化合物(MY-1,MY-2和MY-3)的结构;通过噻唑蓝(MTT)法筛选出细胞毒性较强的化合物MY-2做进一步机制研究,采用流式细胞术检测化合物MY-2对前列腺癌PC-3细胞的凋亡和细胞周期的影响、原位末端标记法(TUNEL)染色法检测凋亡形态、线粒体膜电位荧光探针JC-1检测线粒体膜电位(△ψm)变化、免疫印迹(Western blotting)技术检测Bcl-2,Bax,p53和caspase-3蛋白表达量。 结果:鉴定化合物结构分别为24,25-环氧-环菠萝蜜烷-1α,2α,3β-三醇(MY-1),环菠萝蜜烷-24-烯-1α,2α,3β-三醇(MY-2)和环菠萝蜜烷(-)1α,2α,3β,25-四醇(MY-3);其中化合物MY-2对前列腺癌PC-3细胞表现出相对较强的细胞毒性(IC50(半数抑制浓度)值分别为MY-1:13.4±2.2μM、MY-2:9.6±1.3μM和MY-3:大于50μM);给予化合物MY-2后:前列腺癌PC-3细胞的存活率降低,出现明显的凋亡信号,线粒体膜电位(△ψm)降低,细胞在GO/G1和G2/M期受到抑制,Bcl-2蛋白表达量减少,Bax、p53和caspase-3蛋白表达量增加,具有统计学意义。 结论:化合物MY-2可诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡,线粒体途径是其凋亡途径之一。