聚苯胺和玉米醇溶蛋白管性能、制备以及在神经损伤修复的研究

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本文主要分为三个部分:第一部分是种子细胞的分离培养。此部分通过对神经进行预变性处理,从成年SD大鼠的坐骨神经内分离扩增出雪旺细胞,为后续工作提供种子细胞。第二部分对聚苯胺作为植入式电极涂层材料进行评价。实验表明:1、聚苯胺涂层以纳米球形颗粒(20nm~40nm)形态界面聚合于铂电极表面;2、在体外长期电刺激模型中,此涂层保护电极抵抗电流腐蚀效果显著,并长期稳定。涂层整体完整,无脱落、开裂,纳米球形颗粒微观形貌亦保持,显示出良好的抗腐蚀性和稳定性;3、在SD大鼠视网膜匀浆电刺激模型中,聚苯胺涂层有效抑制电极对网膜匀浆组织的非特异性吸附,并保护其所在组织遭受电刺激诱发的脂质过氧化的攻击,展现出良好的组织保护作用。第三部分对玉米醇溶蛋白管的制备及其对SD大鼠5mm坐骨神经缺损的修复作用进行了初步研究。第一节重点探讨玉米醇溶蛋白神经导管的制备及基本性能评价,就其导电性、通透性、生物活性、力学性能等展开研究。自主研发导管制备方法——浸提法,并申请中国专利保护。结果表明: 1、玉米醇溶蛋白及其降解产物具有良好的细胞相容性,PC12细胞对其降解产物存在剂量依赖性;2、导管管壁具有选择通透性;管内壁涂覆具有缓释潜能的纳米级玉米醇溶蛋白微球;管体力学性能适配手术操作和体内植入;3、导管导电性通过涂覆聚苯胺来实现。聚苯胺本身具有良好的细胞相容性,但其降解产物在一定浓度下对细胞的增殖有抑制作用;4、导管生物活性可通过接种细胞或细胞外基质来实现。第二节建立SD大鼠5mm坐骨神经缺损动物模型,评价无生物活性导管和导电导管的实际修复功效。结果显示,无生物活性导管和导电导管均能在4周内成功桥接SD大鼠5mm坐骨神经缺损,再生轴突长过神经缺损与远端神经相连。这为更好的修复周围神经提供了可能。本文的创新点主要有:一、将聚苯胺用作植入式电极涂层,首次在SD大鼠视网膜匀浆体系下评价聚苯胺涂层的保护作用。1、聚苯胺涂层具有纳米级微观形貌,球形纳米颗粒形态展现出良好的稳定性;2、在体外电刺激模型中,聚苯胺涂层保护电极抗电流腐蚀效果显著,不仅涂层长期稳定,而且纳米级微观形貌保持良好;3、在SD大鼠视网膜匀浆电刺激模型中,聚苯胺涂层有效减少电极对网膜组织碎片的非特异性吸附,从而降低炎症反应程度;此外还能明显保护所在组织遭受电刺激引发的脂质过氧化攻击。二、首次将玉米醇溶蛋白引入周围神经损伤领域,并将其制备成神经导管用于修复神经损伤。玉米醇溶蛋白管及其制备方法申请中国专利保护。1、玉米醇溶蛋白神经导管具有良好的细胞相容性。导管植入体内后可被降解吸收;体外细胞实验显示PC12细胞对玉米醇溶蛋白管的降解产物存在剂量依赖性。2、自主研发导管的制备方法。此法操作简单,可重复性强,适用范围广。可制备不同管径(>0.28mm)、管长和壁厚(>18μm)的组织工程用导管。3、首次将玉米醇溶蛋白与聚苯胺相结合,实现导电导管的制备。为损伤神经早期功能恢复提供可行性。
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