转录因子红细胞系-2p45(NF-E2)相关因子-2(Nuclear factor erythroid-2 p45 related factor, Nrf2)是调控II相解毒酶基因，抗氧化基因和某些药物转运泵基因表达的关键转录因子。最新研究表明在肺癌等多种恶性肿瘤中，Nrf2的关键阻遏物Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)发生突变，导致Nrf2信号通路调控异常，下游基因过量表达，由此促进癌细胞生长、增强对抗癌药物的耐药性，Nrf2因而被认为是新的癌基因。因此，研究非Keap1依赖的Nrf2调控机制，有利于发现增敏肿瘤的潜在药物靶点。本课题组在前期工作中有两项重要发现：i)丝裂原活化激酶磷酸酶1(Mitogen-activated protein (MAP)kinase phosphatase 1,Mkp-1)不仅直接而且可以间接通过c-Jun氨基末端激酶(the c-jun N-terminal kinases ,JNK)调控Nrf2的稳定性；ii)核受体维甲酸X受体α(retinoicXreceptoralpha,RXRα)具有抑制Nrf2的特性。本研究利用分子生物学、生物化学、细胞生物学等方法，在本课题组前期工作的基础上，从三方面在蛋白质水平深入研究了非Keap1依赖的Nrf2调控机制：第一方面本研究通过放线菌酮试验(Cycloheximide chase assays)在Mkp-1降表达细胞株中对Nrf2的半衰期进行检测，明确了Mkp-1对Nrf2稳定性的调控。并基于前期的工作通过免疫共沉淀和Gst融合蛋白沉降方法进一步明确了两者直接相互作用的位点；第二方面研究了JNK介导Nrf2降解的机制。发现在细胞核中，P-JNK结合Nrf2的C端，通过磷酸化Nrf2的Neh6功能域介导Nrf2的降解，并通过定点突变、特异性位点磷酸化抗体和质谱等方法初步明确Nrf2的磷酸化位点。第三方面研究核受体RXRα抑制Nrf2通路的机制。通过免疫共沉淀和Gst融合蛋白沉降方法参与定位RXRα与Nrf2相互作用位点，和课题组其它成员一起发现Nrf2的新结构域Neh7和RXRα的DNA结合区域(DNA Binding Domain,DBD)相互作用。本研究发现了调控Nrf2的新机制，将会为开辟治疗癌症新途径提供理论依据。