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乙型肝炎是一种传染病,由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)的感染,导致的以肝脏病变为主的疾病。临床症状包括上腹部不适、肝区痛、乏力等表现,部分患者可有黄疸发热和肝功能损害。乙型肝炎患者常发生慢性化,进而发展成肝纤维化、肝硬化,少数患者可发展为肝癌。全世界大约有3亿慢性HBV感染者,每年有50至100万HBV感染者死于乙型肝炎相关性疾病。HBV可引起持续炎症和病毒血症,而这些并发症同时也会增加终末期肝脏严重损伤和癌症风险。在HBV急性感染后,部分患者可迅速清除病毒,但仍有患者形成持续性感染,进而引起肝脏的慢性损伤,诱导肝纤维化的发生。目前,慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)可以控制但不能治愈,CHB患者的治疗管理可以阻止或减缓病情进展,减少并发症,但不可能根除HBV。HBV感染的发生和进展结果取决于病毒和宿主免疫系统之间的相互作用,及在这个过程中所产生的动态应答平衡。固有免疫和适应性免疫应答调控是HBV清除的重要因素。虽然HBV感染后的适应性免疫应答及信号转导机制已经得到了广泛的研究,但依然有很多未知领域有待进一步探讨。B淋巴细胞产生抗体的过程中,CD4~+T细胞是一种主要辅助细胞,B淋巴细胞能否产生抗体,与CD4~+T细胞的功能能否正常发挥有着一定的关系,并且具有决定性的作用。滤泡辅助性T淋巴细胞(T follicular helper cell,Tfh cell)作为一种特殊的CD4~+T细胞亚群,可通过调节B细胞功能介导体液免疫应答。最新研究发现,Tfh细胞定位于淋巴滤泡内,在B淋巴细胞活化的过程中起到一定的辅助作用,在生发中心(Germinal center,GC)的形成过程中有一定的诱导作用,所以说在高亲和力抗体产生的过程中有一定的加强作用。相对于HBV感染来说,Tfh细胞的状态是由多种调节机制来决定的,以及其活化状态的改变也由多种调节机制来反应,对此转录因子的调节在这个过程中发挥着很大的作用。既往研究发现,B淋巴细胞淋巴瘤因子6(B-cell lymphoma 6,Bcl-6)是一种极其重要的转录因子,尤其发挥着举足轻重的作用,在Tfh细胞分化和增殖的过程中。但近年来人们发现了另一种特殊的转录因子“无刚毛鳞甲复合体样蛋白2(Achaete-scute homologue2,Ascl-2)”,其可能在Bcl-6介导的Tfh分化过程的启动阶段引导Tfh细胞分化进程,在Tfh细胞分化过程中发挥着重要作用。目的:检测CHB患者和健康者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中CD4~+T细胞亚群表面分子表达变化,分析Tfh细胞功能状态与肝功能之间的相关性,探讨慢性HBV感染过程中,外周血Tfh细胞转录因子Ascl-2的表达。方法:收集2015年9月至2016年6月唐都医院门诊或住院的CHB患者外周血样本50例,整理患者治疗相关的临床信息。入组CHB患者经确诊无其他病毒感染(HIV、HAV、HCV、HDV、HEV等)、自身免疫性疾病及代谢遗传性肝病等。另取对照组:35例健康志愿者外周血样本。CD4~+T淋巴细胞来自于外周血中的各亚群比例变化采用流式细胞技术分析,以及PD-1等Tfh细胞表面重要信号分子的表达情况也应用流失细胞技术分析;应用ELISA技术检测血浆中IL-4、IL-17、IL-21及IFN-γ等细胞因子的水平;分离样本PBMCs,Ascl-2 mRNA(来源于Tfh细胞)的表达水平采用实时定量PCR法检测;应用全自动生物化学分析仪对肝脏炎症的临床指标的变化进行检测,对以上的各项临床指标与HBV感染的相关性进行分析。结果:与健康对照组相比:(1)慢性HBV感染患者的CD4+CXCR5+Tfh及CD4+CXCR5+PD-1+Tfh细胞的比例明显升高,且差异具有统计学意义(P<0.05);(2)慢性HBV感染患者中Ascl-2 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);(3)慢性HBV感染患者的血清中IL-21、IL-17均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性乙型肝炎病毒感染者Tfh细胞频数及其表面分子与正常人群存在明显差异,提示Tfh细胞与慢性乙肝病毒感染者的免疫应答密切相关,Ascl-2可能参与HBV感染者Tfh细胞的异常分化过程。