二十二碳六烯酸（Docosahexenoic acid，简称DHA）是一种具有重要生理功能的ω-3系列多不饱和脂肪酸，具有健脑益智、保护视力、预防心血管疾病以及提高机体免疫能力等重要生理功能。因此，DHA在医药、食品、饲料等行业具有广阔的应用前景，其制备和加工方法也日益受到关注。DHA的传统来源主要是从深海鱼油中提取，但是鱼油成分复杂且DHA含量较低，因而，寻找并利用海洋微生物发酵生产DHA已逐渐成为研究的热点。裂殖壶菌（Schizochytrium）是一种海洋真菌，具有生长快、不饱和脂肪酸组成简单、DHA含量高以及对人畜无毒害等特点，是一种极具工业化生产前景的DHA微生物资源。本文选用Schizochytrium limacinum SR21来发酵生产DHA，主要研究内容和结果如下：1）根据油脂提取工艺的研究结果，确定了以酸热法破壁，氯仿-甲醇为提取溶剂的油脂提取方法，即酸热-有机溶剂法。经过优化后，以该方法获得的油脂得率为52.56%，相对于优化前（45.74%）提高了14.91%。本文将磷酸香草醛反应法与优化后的酸热-有机溶剂法相结合，建立了快速测定菌株油脂的标准曲线，以此曲线对菌株总脂量的变化进行快速分析，并据此在后续诱变选育中快速筛选油脂高产菌株。2）考察了外源添加物生物素、柠檬酸、苹果酸和洛伐他汀对Schizochytrium limacinumSR21发酵产DHA的影响。结果表明外源添加物不仅能够提高DHA的产量，还可以改变细胞内脂肪酸的分布情况，提高DHA在脂肪酸中的百分含量。经正交实验得到最优外源添加物组合：0.3mg/L生物素，1g/L苹果酸和0.4mg/L洛伐他汀。在添加该外源添加物组合发酵后，总油脂产量为28.93g/L，占细胞干重68.88%，DHA产量高达11.55g/L，相对于原始菌株（6.72g/L）提高了71.87%，DHA在总油脂中所占百分比由31.93%提高到39.92%。3）以Schizochytrium limacinum SR21为出发菌株进行DHA高产菌株选育时，首先确定筛选平板中碘乙酸和丙二酸的最适浓度，15℃的低温培养条件，并以菌株的油脂产量和DHA产量作为筛选指标。分别用常压室温等离子体（ARTP）诱变、紫外（UV）诱变和ARTP-UV复合诱变后，经过磷酸香草醛反应法初筛，GC复筛，最终得到一株DHA高产突变株AU-1，并且该菌株传代5次后仍保持较好的遗传稳定性。摇瓶发酵后，该菌株DHA产量高达11.81g/L，比原始菌株6.72g/L提高了75.74%，DHA在脂肪酸中所占比例由31.93%增加到40.47%。经5L发酵罐发酵后，生物量、油脂产量和DHA产量分别为50.71g/L、35.65g/L、15.43g/L，生产强度达到142.87mg/L/h，与原始菌株（46.78g/L、32.65g/L、13.26g/L、110.5mg/L/h）相比均有一定程度的提升，其中DHA产量提高了16.37%，效果显著。