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目的:以仙鹤草醇提取部位抗炎作用的确证为基础,对具有抗炎活性的不同极性部位进行药理活性筛选、作用机制研究,进而分离活性单体成分并鉴定化学结构,探讨仙鹤草抗炎作用的物质基础及作用机制。方法:1仙鹤草醇提取部位抗炎作用的确证采用70%乙醇回流提取以制备仙鹤草醇提取部位,采用热板法、扭体法、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验,确证仙鹤草醇提取部位是否具备抗炎作用。2仙鹤草抗炎作用活性部位的研究2.1仙鹤草不同提取部位抗炎作用的筛选采用70%乙醇回流提取,得到仙鹤草醇提取部位,依次用乙酸乙酯、正丁醇对仙鹤草醇提取部位进行萃取,以制备仙鹤草不同提取部位。采用扭体法、二甲苯致小鼠耳肿胀实验及磷酸组胺致毛细血管通透性实验,对仙鹤草不同提取部位进行抗炎作用的筛选。2.2仙鹤草正丁醇提取部位抗炎机制的研究采用花生四烯酸（Arachidonic acid,AA）、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀模型,通过蛋白质印迹法（Western Blot,WB）检测大鼠足部组织中环氧酶（Cyclooxygenase,COX）、5-脂氧合酶（5-Lipoxygenase,5-LO）的含量,筛选仙鹤草正丁醇提取部位的抗炎途径。3仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位的抗炎有效部位筛选3.1仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位的制备仙鹤草正丁醇提取部位采用大孔树脂进行初步分离,得到得仙鹤草正丁醇提取部位的水洗脱部位、30%乙醇洗脱部位、60%乙醇洗脱部位、90%乙醇洗脱部位。3.2仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响对仙鹤草正丁醇提取部位的不同洗脱部位采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验,筛选仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位的抗炎有效部位。4仙鹤草正丁醇提取部位的90%乙醇洗脱部位的抗炎作用研究采用AA、角叉菜胶致小鼠足趾肿胀模型,分别于注射后1h、2h、3h、4h用游标卡尺测定小鼠鼠爪足趾厚度,各组小鼠在注射AA或角叉菜胶4h后,取血,采用ELISA试剂盒检测小鼠血液中白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）、前列腺素E2（Prostaglandin E2,PGE2）、白三烯B4（Leukotriene B4,LTB4）、肿瘤坏死因子α（Tumour necrosis factor-α,TNF-a）、白细胞介素10（Interleukin-10,IL-10）的含量。5仙鹤草正丁醇提取部位的90%乙醇洗脱部位的化学成分分离取仙鹤草正丁醇提取部位的90%乙醇洗脱部位用硅胶、葡聚糖凝胶LH-20等柱色谱法和重结晶的方法进行分离。结果:1仙鹤草醇提取部位抗炎作用的确证热板法实验结果显示,与模型组比较,仙鹤草醇提取部位组在给药后15min、30min,能升高小鼠的痛阈值;但在给药45min、60min、90min对小鼠的痛阈值无影响。扭体法实验结果显示,与模型组比较,仙鹤草醇提取部位能减少小鼠疼痛的扭体次数;冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验结果显示,与模型组比较,仙鹤草醇提取部位组能降低小鼠腹腔毛细血管通透性。表明仙鹤草醇提取部位主要通过抗炎而产生外周镇痛作用。2仙鹤草抗炎作用活性部位的研究2.1仙鹤不同提取部位抗炎作用部位的筛选扭体法实验结果显示,与模型组比较,仙鹤草的醇提取部位和正丁醇提取部位均能减少小鼠扭体反应的次数,差异有统计学意义;仙鹤草乙酸乙酯提取部位虽能减少小鼠扭体反应的次数,但差异无统计学意义。二甲苯致小鼠耳肿胀实验结果显示,与模型组比较,仙鹤草的醇提取部位和正丁醇提取部位都能降低小鼠的耳肿胀程度,差异有统计学意义。磷酸组胺致毛细血管通透性实验结果显示,跟模型组相比,仙鹤草的醇提取部位、乙酸乙酯提取部位和正丁醇提取部位都能降低小鼠毛细血管的通透性,差异有统计学意义。提示仙鹤草具有明显的抗急性炎症的作用,其活性主要集中在正丁醇提取部位。2.2仙鹤草正丁醇提取部位抗炎机制的研究仙鹤草正丁醇提取部位抗炎结果显示:与AA组、角叉菜胶组比较,仙鹤草正丁醇提取部位能够减少AA、角叉菜胶诱导的大鼠足趾肿胀度,差异有统计学意义。WB检测结果显示:与AA组、角叉菜胶组比较,仙鹤草正丁醇提取部位能够减少AA、角叉菜胶诱导的大鼠足趾组织中环氧酶-1（Cyclooxygenase-1,COX-1）、环氧酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）、5-LO的表达,差异有统计学意义。提示仙鹤草正丁醇提取部位对花生四烯酸、角叉菜胶注射致大鼠足趾肿胀模型两条炎症途径均有抑制作用。3仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位的抗炎有效部位筛选3.1仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位的制备取仙鹤草正丁醇提取部位,以D101大孔树脂为填料采用柱色谱进行初步分离,得到水洗脱部位、30%乙醇洗脱部位、60%乙醇洗脱部位和90%乙醇洗脱部位。3.2仙鹤草正丁醇提取部位不同洗脱部位对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响与模型组比较,仙鹤草90%乙醇洗脱部位能抑制小鼠耳肿胀度,差异有统计学意义。4仙鹤草正丁醇提取部位90%乙醇洗脱部位的抗炎作用研究与模型组比较,仙鹤草正丁醇提取部位的90%乙醇洗脱部位能抑制角叉菜胶、AA小鼠足趾肿胀度,差异有统计学意义;能抑制角叉菜胶、AA小鼠足趾肿胀模型中IL-1β、TNF-a、PGE2的含量,升高IL-10的含量,差异有统计学意义,但对LTB4未见明显抑制作用。5仙鹤草正丁醇提取部位90%乙醇洗脱部位的化学成分分离取正丁醇提取部位应用柱色谱法和重结晶等方法分离得到8个单体化合物,已鉴定了5个化合物:科罗索酸（Corosolic aci）,槲皮素（3,3’,4’,5,7-Pentahydroxyflavone）、芦丁[3,3’,4’,5,7-Pentahydroxy-flavon3-（o-rhamnosylglucoside）]、β-谷甾醇（β-Sitosterol）、胡萝卜苷（Daucosterol）。结论:1.仙鹤草具有抗炎作用,其活性成分集中在正丁醇提取部位,可通过抑制COX和5-LO两条途径发挥抗炎作用。2.仙鹤草正丁醇提取部位的90%乙醇洗脱部位通过抑制COX途径从而降低致炎因子PGE2、IL-1β、TNF-a的表达,升高抗炎因子IL-10的表达实现抗炎,但对5-LO途径诱导的LTB4未见明显抑制作用。3.从仙鹤草正丁醇提取部位分离得到8个化合物,已鉴定了5个化合物,分别为科罗索酸、槲皮素、芦丁、胡萝卜苷、β-谷甾醇,其中文献报道科罗索酸、槲皮素和芦丁均具备抗炎活性,表明仙鹤草正丁醇提取部位的90%乙醇洗脱部位是由科罗索酸、槲皮素和芦丁等共同发挥抗炎作用。