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花青素是一类广泛存在于植物中的水溶性色素,属类黄酮化合物,具有抗氧化、抗突变等多种生物学功能。本课题以茶树红紫色芽叶为材料,研究茶叶中花青素类物质的分析和分离纯化方法、并对部分花青素组分的结构进行了初步鉴定,以期为茶树紫色芽叶的发生机理、花青素单体药理与生物学作用的研究提供分析方法和理论基础。研究结果如下:1、建立了茶叶花青素的HPLC分析方法。其色谱条件为:BDS Hypersil C18色谱柱;流动相A相为2%甲酸水溶液,B相为乙腈;洗脱梯度为:0～40min,B相由10%→40%;流速0.8mL/min;进样量10μL,柱温28oC,二极管阵列检测,检测波长520nm。2、应用所建立的HPLC方法分析茶叶花青素粗品,经分析可以分离出9个主要的色谱峰,仅有1个峰为双组分,其余均为单组分;运用HPLC-DAD-MS/MS联用技术,获得了其中7个组分的紫外-可见光谱信息、质谱数据,同时结合文献资料报道的花青素组分的出峰顺序,推测了茶叶花青素中5个主要组分分别为:飞燕草-3-半乳糖苷、矢车菊-3-半乳糖苷、飞燕草-3-芸香糖苷、矢车菊-3-芸香糖苷、天竺葵-3-芸香糖苷,另外2种同分异构体的结构有待进一步确定。3、以矢车菊-3-葡萄糖苷为标样,建立了茶叶花青素含量测定的外标法,其标准曲线方程为:Y=1.87×107x-81360,R2=0.9985,花青素含量在0—0.30μg呈良好线性关系。经测定制备的茶叶花青素粗品纯度为32.0%。4、探讨了HSCCC分离纯化茶叶花青素组分的方法,初步确定了适合茶叶花青素组分分离的溶剂体系为:MTBE∶正丁醇∶乙腈∶水∶三氟乙酸(3∶1.5∶1∶5∶0.015 v/v),上相为固定相,下相为流动相;分析型HSCCC仪器参数为:转速1800 r/min,流速0.8 mL/min,温度25℃,进样体积20μl;半制备型HSCCC仪器参数为:转速900r/min,流速2mL/min,温度25℃,进样体积20mL。