可量化型小鼠坐骨神经缩窄性病理神经痛模型的建立与评估

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通过建立可量化型小鼠坐骨神经缩窄性神经病理痛模型,评价其行为学、坐骨神经超微结构,脊髓小胶质细胞活化和细胞因子表达量的影响。并观察电针治疗对可量化型坐骨神经缩窄性神经病理痛模型小鼠的镇痛效应和脊髓炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-?表达的影响。方法:雄性C57/BL6小鼠32只随机分为N0、N1、N2和N4组(n=8),用分级坐骨神经结扎的方法建立动物模型。在术前和术后第1-29天测定小鼠右后爪机械痛反应阈值(Paw Withdrawal Threshold,PWT)和热刺激疼痛阈值(Thermal Withdrawal Latency,TWL)。分别于术后14天和29天取右侧坐骨神经和腰段脊髓,电镜观察坐骨神经超微结构并计数异常髓鞘所占百分比,免疫组化测小胶质细胞OX-42的荧光积分光密度值(Integral optical density,IOD),并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脊髓白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-?(TNF-?)的浓度。另将雄性C57/BL6小鼠56只随机分为假手术组(N0)、结扎一道组(N1)、一道电针组(N1+E)、结扎两道组(N2)、两道电针组(N2+E)、结扎四道组(N4)和四道电针组(N4+E)(n=8),用分级坐骨神经结扎的方法建立动物模型,一道电针组(N1+E)、两道电针组(N2+E)和四道电针组(N4+E)分别取双侧“环跳”和“足三里”穴进行电针治疗。在术前和术后第2、4、6、8、10、12、14天测定小鼠右后爪机械痛阈值。术后14天取腰段脊髓,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脊髓白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-?(TNF-?)的浓度。结果:与N0组相比,N1、N2和N4组术后机械痛和热痛阈值较术前明显下降(P<0.05);与N0组比较,N1、N2和N4组术后14天和29天均存在坐骨神经纤维广泛洋葱化改变,轴索溶解或消失,雪旺细胞水肿、坏死,且异常髓鞘所占比例随结扎神经道数增加(P<0.05);N2、N4组术后14天和29天脊髓小胶质细胞OX-42的IOD增加(P<0.05);并且N1、N2和N4组术后14天和29天脊髓IL-1β、IL-6和TNF-?表达不同程度上升(P<0.05)。与N1组相比,电针可提高N1+E组术后机械痛阈值,差异有统计学意义(P<0.05),但电针对N2+E和N4+E组机械痛改变不明显。与N0组比,N1、N2和N4组脊髓IL-1β、IL-6和TNF-?表达显著上调(P<0.05),电针可降低N1+E组IL-1β、IL-6、TNF-?的表达和N2+E组IL-1β的表达(P<0.05),而对N2+E组IL-6、TNF-?和N4+E组IL-1β、IL-6、TNF-?下调作用不明显。结论:小鼠可量化型坐骨神经缩窄模型可引起不同程度的神经病理性疼痛,导致坐骨神经不同程度的髓鞘病变,脊髓小胶质细胞活化,并增加脊髓IL-1β、IL-6和TNF-?的表达。电针可减轻小鼠分级坐骨神经缩窄模型引起的痛觉过敏,并降低脊髓IL-1β、IL-6和TNF-?的表达。
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