论文部分内容阅读
目的： 阐明黄芩苷、栀子苷（BC/GD）配伍抗脑缺血恢复期炎性损伤的作用及机制研究。 方法： SD雄性大鼠，体重215～255g，建立永久中动脉阻塞模型（pMCAO）。随机分为对照组、模型组、BC/GD配伍（7∶3）30mg/kg、45mg/kg和60mg/kg组，各组均于造模12h后灌胃给药，每天两次，连续给药1-35天，对照组、模型组给予等量纯净水。 1.BC/GD配伍对恢复期pMCAO大鼠的治疗作用研究：在恢复期1-35d每隔7d进行检测，采用Bederson5级评分及Longa评分结合，评价其神经功能改变，并记录体重变化；干重、湿重法检测脑含水量变化；HE染色观察脑组织病理损伤变化；ELISA检测脑组织TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-10的含量。 2.BC/GD配伍对恢复期pMCAO大鼠的治疗机制研究：ELISA法检测脑组织中CysLTs的含量；Western blot检测脑组织5-LOX、CysLT1、CysLT2变化。 3.BC/GD配伍对恢复期pMCAO大鼠小胶质细胞的影响：恢复期1-35d内，每隔7d处理部分动物，免疫荧光双标观察脑组织活化型小胶质细胞标记物CD11b及5-LOX阳性细胞的变化。 结果： 1.BC/GD配伍能够有效的降低pMCAO大鼠的脑含水量（P＜0.01），在1-14d内，延缓pMCAO大鼠体重下降趋势，且可以改善pMCAO大鼠的神经功能（P＜0.01）。病理学变化显示Con组大鼠大脑皮层及海马区组织完整，结构清晰，pMCAO组大鼠脑组织出现局部水肿及炎症损伤；与pMCAO组比较：各给药组正常神经元数量明显增多，坏死组织不同程度减少；在1-35d内，BC/GD配伍可以降低TNF-α、IL-10含量，增加TGF-β、IL-10含量。 2.在1-35d内，BC/GD配伍后可以持续降低CysLTs含量，该效果在1-21d更为显著，BC/GD配伍各组均能对5-LOX/CysLTs/CysLT通路产生抑制作用。 3.在缺血后的1-21d天中，小胶质细胞激活增加，5-LOX表达增高，BC/GD配伍各组均可以抑制小胶质细胞激活，降低5-LOX表达。 结论： 在脑缺血恢复期1-35d中，BC/GD配伍能够显著降低脑缺血大鼠体重下降趋势，降低脑含水量，减轻缺血病理损伤，改善神经功能学评分，降低促炎因子水平，升高抗炎因子水平，降低CysLTs含量，抑制5-LOX、CysLT1、CysLT2的表达并抑制小胶质细胞活化。说明其在恢复期内可以通过抑制5-LOX/CysLTs/CysLT信号通路而发挥抗炎作用，且对该通路的抑制效果可能与抑制小胶质细胞活化相关。