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目的 研究BALB/c妊娠小鼠感染弓形虫后脾脏T淋巴细胞亚群的变化,己烯雌酚(DES)对弓形虫感染孕鼠脾脏T细胞亚群的抑制作用,DES对弓形虫垂直传播的影响及其作用机制。 材料方法 将6~8周龄妊娠第0天的BALB/c小鼠80只随机分为4组:空白对照组,实验对照组,低剂量DES组和高剂量DES组。后3组动物于妊娠第8天腹腔接种弓形虫RH株速殖子400个/只,空白对照组给予相同剂量的生理盐水。于妊娠第10、13天,低剂量组皮下注射DES 1μg/100g,高剂量组皮下注射DES 10μg/100g,空白对照组和实验对照组皮下注射无菌豆油(己烯雌酚溶剂)200μl。 分别于妊娠第12,14,16,18天,摘眼球采血,放免法测定血清雌二醇水平;取脾脏制成单细胞悬液,用流式细胞仪检测CD4~+和CD8~+T细胞水平;称取胸腺重量;切开子宫,计数活胎、死胎、吸收胎,计算平均活胎率,并用ELISA检测宫内胚胎弓形虫感染情况。 结果 实验对照组4个时期的脾脏T细胞亚群百分率均随妊娠天数增多而升高,但CD4~+T细胞变化趋势为先升高后降低(35.25%,40.84%,39.14%,36.99%);CD8~+T细胞表现为逐渐上升(24.42%,31.01%,40.22%,47.50%);CD4~+/CD8~+比值逐渐降低。与空白对照组比较,该组CD4~+与CD8~+T细胞于14,16,18天有显著增高(P<0.05);CD4~+/CD8~+比值降低,16,18天有显著性(P<0.05)。这表明BALB/c妊娠小鼠感染弓形虫后,CD4~+和CD8~+都参与了抗感染过程,并且CD8~+T细胞在外周免疫中起主导作用,是抗弓形虫感染的主要T细胞亚群。 与空白对照组相比,实验对照组血清雌二醇水平有下降趋势,而脾脏 CD4”和 CDS“T细胞水平升高,CD4”/CDS”LL值降低,同时该组的胸腺重量较重。提示雌激素对感染弓形虫的妊娠BALB/。小鼠的脾脏T细胞亚群及胸腺重量有抑制作用,且对CDS丁细胞的抑制作用更大,使得CD4“/CDS”值升高。 孕鼠感染弓形虫后,实验对照组的活胎率和垂直传播率分别为66.28%和 48.83%。DES处理后,低剂量组活胎率和垂直传播率为 80.00%。N.44%,均显著高于实验对照组(*<0.05L 该组的血清雌二醇水平也明显升高(P<0.05);高剂量组的活胎率和垂直传播率与实验对照组之间无显著差异,雌二醇水平除12天较高外,其余与实验对照组之间无显著差异。分析脾脏T淋巴细胞水平,结果与实验对照组相比,低剂量组CD矿T细胞水平降低门4,16,18天,P<0.05),CDS”T细胞水平各个时期均显著降低(P<0.05),高剂量组 CD4”及 CDS”T细胞亚群水平无明显变化。上述结果提示适当剂量的DES对感染弓形虫的妊娠BALB/。小鼠的脾脏T细胞亚群有抑制作用,且对CDS+T细胞的抑制作用更大,由于这种抑制作用进而导致弓形虫病垂直传播率升高。而高剂量组外用血雌二醇水平无明显变化的原因可能是较高剂量的DES抑制了自身雌激素的分泌,因此对CD4\CDS+T细胞亚群水平及弓形虫垂直传播率无显著影响。 结论 脾脏 CD4“to CDS”T细胞都有抗弓形虫感染的作用,n CDS“T细胞占主导;雌二醇降低CD4”和 CDS+T细胞水平,减轻胸腺重量;一定剂量的DES可以使活胎率增高,但垂直传播率也随之升高,表明控制感染与维持妊娠之间相互矛盾,DES有利于妊娠,却不利于抗感染。 总之,雌二醇对脾脏T细胞尤其是**河细胞亚群的抑制作用是导致弓形虫病垂直传播率升高的重要因素之一。