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第一部分转录因子AP-2α通过直接调节CD36参与动脉粥样硬化目的:转录因子激活蛋白-2α（AP-2α）在发育、分化和肿瘤过程中调节细胞型别的特异性基因的表达,但迄今为止,还未见AP-2α在动脉粥样硬化中发挥作用的相关报道。目前的研究在于探讨AP-2α通过直接调节CD36基因在动脉粥样硬化的泡沫细胞形成中发挥的潜在作用。方法:本研究应用免疫组化和双免疫荧光染色检测AP-2α在apoE-/-小鼠和人动脉粥样硬化病变的表达;相对定量PCR、westernblot和免疫荧光染色检测AP-2α对大鼠血管平滑肌细胞表达CD36的影响;油红O染色和高效液相色谱分析法测量大鼠血管平滑肌细胞内的脂质蓄积;萤光素酶分析试验、电泳迁移率变动分析试验和染色质免疫沉淀法用于证明AP-2α对CD36基因启动子的直接调节。结果:AP-2α主要在apoE-/-小鼠和人动脉粥样硬化病变的泡沫细胞内高表达。AP-2α上调大鼠血管平滑肌细胞CD36基因的mRNA和蛋白表达并促进大鼠血管平滑肌细胞内的脂质蓄积。AP-2α过表达能增强CD36基因启动子活性,在CD36基因启动子区域存在两个AP-2结合位点,突变这两个结合位点能削弱AP-2α对CD36基因启动子活性的增强效应。结论:AP-2α通过直接调控CD36基因的表达来增加细胞对脂质的摄取,从而在动脉粥样硬化的形成中发挥了作用。第二部分转录因子AP-2α参与多沙唑嗪诱导的HeLa细胞凋亡目的:研究α1-肾上腺素受体拮抗剂多沙唑嗪对HeLa细胞凋亡的影响以及转录因子AP-2α在多沙唑嗪诱导的HeLa细胞凋亡中发挥的作用。方法:不同浓度的多沙唑嗪处理HeLa细胞16h,通过DNA片断形成分析、Hoechst 33258染色和流式分析检测多沙唑嗪对HeLa细胞凋亡的影响;以相对定量PCR和Western blot分析检测AP-2α和caspase-3的表达。以AP-2α过表达质粒或反义AP-2α寡核苷酸分别转染HeLa细胞后,通过流式检测凋亡效应;相对定量PCR和Western blot分析检测AP-2α和caspase-3的表达;比色法检测caspase-3的酶活性。结果:多沙唑嗪以剂量依赖性方式增加HeLa细胞的凋亡率和总细胞死亡率,并以剂量依赖性方式上调AP-2α和caspase-3的表达,caspase-3的活性也呈剂量依赖性方式增长。AP-2α的过表达导致多沙唑嗪诱导的HeLa细胞的凋亡率和总细胞死亡率增加,而反义AP-2α却导致多沙唑嗪诱导的HeLa细胞的凋亡率和总细胞死亡率降低。此外,过表达的AP-2α增强caspase-3的表达和活性,而反义AP-2α部分地阻断了多沙唑嗪对caspase-3表达及活性的增强效应。结论:多沙唑嗪以剂量依赖性方式诱导HeLa细胞凋亡,转录因子AP-2α在多沙唑嗪诱导的HeLa细胞凋亡中发挥了作用。