【摘 要】
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目的:该实验研究旨在检测AML在初治、化疗缓解后、复发时MK基因与蛋白表达水平变化,明确其基因表达是否与蛋白表达平行;探讨MK的表达水平与AML的FAB分型及预后的关系;检测bcl
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目的:该实验研究旨在检测AML在初治、化疗缓解后、复发时MK基因与蛋白表达水平变化,明确其基因表达是否与蛋白表达平行;探讨MK的表达水平与AML的FAB分型及预后的关系;检测bcl-2基因表达水平,推断其与MK表达的相关性,探讨MK抗凋亡的机制;同时,检测mdr-1基因表达水平,分析MK与白血病细胞耐药的相关性.从而推断MK在AML发生、发展中的作用及其作用机制,以期为成人急性白血病的临床治疗、判断预后及转归提供新的思路.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测65例急性髓系白血病(AML)患者(包括初治、复发和缓解期患者)、正常人的骨髓单个核细胞和髓系白血病细胞株K562和HL-60的MK、bcl-2、mdr-1 mRNA的表达水平;随机选取部分患者和正常人,取骨髓分离单个核细胞,于RPMI1640培养基中孵育24小时,应用蛋白印记(Western blot)方法检测培养细胞的MK蛋白表达,同时检测髓系细胞株K562和HL-60中的MK蛋白表达,明确MK基因水平和蛋白水平是否表达一致,并观察MK与白血病细胞凋亡和临床耐药的关系.结论:1.在AML患者中,MK的基因水平与蛋白水平表达一致.2.在初治或复发的AML患者中,MK表达增高与AML的FAB分型无明确相关性.3.AML患者MK与mdr-1表达无统计学意义上的相关性,MK对AML患者治疗敏感性的影响与mdr-1介导的经典耐药途径不同.4.AML患者MK与缓解率的关系:MK阳性患者完全缓解率(63.16%)低于MK阴性患者的完全缓解率(93.54%),提示MK表达阳性者,CR率低.
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