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猪链球菌病是多年来困扰我国养猪业的主要传染病之一,病原主要是马链球菌兽疫亚种(SEZ)和猪链球菌2型(SS2),急需研制相应的二联灭活疫苗用于预防。
将SS2-9801株和SEZ-9802株的流行病学、症状与病变、药物敏感性、动物致病性和培养特性进行比较。两者裁均可引起猪只突然死亡,体温可升高至42℃以上,均呈急性败血症,两种细菌的形态相似,为革兰氏染色阳性链状球菌。SS2-9801对氧哌嗪青霉素、头孢他啶和氨苄青霉素最敏感;SEZ-9802对氧哌嗪青霉素、头孢哌酮、呋喃妥因和复方磺胺最敏感。两者对兔均有较强致病力,SEZ-9802对猪和小鼠的致病力比前者强。SS2-9801菌落较小(直径约0.5mm),呈α溶血;SEZ-9802菌落较大(直径1.5~2.0mm),呈β溶血。
检测了SS2对BALB/c小鼠和小鼠的致病性。结果显示:SS2-1、SS2-H、SS2-006444和SS2-7对BALB/c小鼠(2只/组)有致病性,其LD50分别为2.1×106cfu、3.1×107cfu、5.3×107cfu和9.4×107cfu,SS2-D株以2.8×108cfu攻击BALB/c小鼠不致死;SS2-1株8×108cfu攻击小鼠不致死。
检测了4株SS2和2株SEZ对猪和兔的致病性。显示SS2毒力因子与对猪、兔的致病性有关。SS2与SEZ菌株对兔或猪的致病性一致,可用兔取代猪做试验。二者通过腹腔、皮下、肌肉或静脉注射均可感染兔(2~4只/组),并致死,SEZ还可经口、鼻感染。SEZ与SS2静脉感染猪后10min即可检出细菌,此后2~4h为无菌血症阶段,之后重新出现。
选取SS2-1、SS2-H、SEZ-CY和SEZ-CT株分别培养,灭活,经浓缩后混合,制成SS2与SEZ二联氢氧化铝灭活苗(铝胶苗)1批和二联油乳剂灭活苗(油乳苗)3批,分别对15~35日龄仔猪(4~6头/组)进行一次免疫或二次免疫(间隔15d),于免疫后21~33d以致死量SS2-1或SEZ-CY进行攻毒保护试验。结果表明:油乳苗一次或二次免疫和铝胶苗二次免疫对SS2-1均产生坚强保护,油乳苗二次免疫对SEZ-CY产生一定保护;而铝胶苗一次或二次免疫对SEZ-CY和一次免疫对SS2-1未能产生有效保护。