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目的:
检测蛋白质磷酸酶2A(Protein phosphatae2A,PP2A)的癌性抑制因子(Cancerous inhibitor of Protein phosphatase2A,CIP2A)在正常膀胱粘膜及膀胱癌组织中的表达,分析CIP2A在膀胱尿路上皮癌组织中表达的关系,探讨CIP2A与膀胱尿路上皮癌临床病理因素的关系以及在膀胱尿路上皮癌(UCCB)发生发展中的作用和意义。
方法:
临床病理资料及组织制作:收集中国医科大学附属第一医院外科手术切除膀胱尿路上皮癌组织48例,配对正常膀胱粘膜15例(距癌灶边缘大于2cm处切取作为照)。常规组织蜡块行4μm组织切片,常规HE染色,用于目标组织的定位。用眼科剪刀剪碎组织,加入0.5ml Trizol试剂裂解组织,确保细胞全部解,收集入1.5mlEP管中,放到-70℃。病理分级低级别23例,高级别25例;复发性膀胱癌17例;15例非肿瘤膀胱组织作对照。
免疫组化法及逆转录聚合酶链反应法检测CIP2A表达:应用免疫组化法及逆转录聚合酶链反应法,对48例临床分期为T1~T3期的膀胱尿路上皮癌组织标本中CIP2A的表达进行检测。免疫组化染色及判定方法:采用免疫组化二步法检测膀胱尿路上皮癌及癌旁正常组织中CIP2A的表达。CIP2A蛋白阳性反应为棕黄色颗粒定位于细胞浆和细胞膜。逆转录聚合酶链及判定方法:Trizol法抽提总RNA进行总RNA提取,聚合酶链反应均按说明进行,在电泳带特定区域有均匀条带出现证明有CIP2A表达。所有数据应用SPSS13.0统计软件进行统计分析,两个或多个总体率的比较应用x2检验,两变量间相关应用Spearman秩相关分析,P<0.05认为有统计学显著性差异。
结果:
实验结果显示48例膀胱癌组织中的39.60%(19/48),有CIP2A蛋白表达;而其余膀胱癌组织及正常对照组均未见表达。其中CIP2A蛋白在低级别中表达率为39.13%(9/23),高级别表达率为40%(10/25),两级之间表达差异无显著性差异(P>0.05);男性的CIP2A阳性表达率39.4%(13/33),而女性为40%(6/15),无显著性差异(P>0.05)。T2-T3分期膀胱尿路上皮癌病人的CIP2A表达为42.1%(8/19),T1分期的CIP2A表达为37.9%(10/29),无明显差异性(P>0.05)。吸烟病人中的CIP2A阳性表达率34.5%(10/28),而不吸烟病人为45%(9/20),无显著性差异(P>0.05)。复发的膀胱癌组织中CIP2A阳性表达率(58.82%,10/17),明显高于初发的膀胱癌组织表达率(29.03%,9/31),二者具有显著性差异(P<0.05)。
结论:
CIP2A在膀胱尿路上皮癌组织中的阳性表达较高,癌旁正常膀胱组织未见表达,提示CIP2A可能作为致癌因子可能参与了膀胱尿路上皮癌的发生发展;随访发现CIP2A与膀胱尿路上皮癌复发有关,检测膀胱尿路上皮癌组织中CIP2A表达有望作为膀胱尿路上皮癌诊断的一种指标,在膀胱肿瘤的预后判断中起重要作用,成为膀胱尿路上皮癌的一个新的治疗靶点。