脱氧鬼臼毒素对粘虫体壁的影响

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脱氧鬼臼毒素为木脂素类化合物,主要存在于小檗科多年生草本类群鬼臼亚科八角莲属、桃儿七属、山荷叶属及足叶草属植物中。西北农林科技大学无公害农药研究服务中心从柏科植物砂地柏中分离得到该化合物。本研究以脱氧鬼臼毒素为供试药剂,采用光学显微观察、聚丙烯酰胺凝胶电泳等多种方法,从组织学和生理学多角度研究脱氧鬼臼毒素对粘虫体壁的影响,以进一步探讨脱氧鬼臼毒素对粘虫的生长发育抑制作用。主要结果如下:1.脱氧鬼臼毒素对粘虫具有明显的生长发育抑制作用:药剂可使幼虫生长发育缓慢,在5 mg·mL-1剂量下对试虫生长发育抑制率达到90.1%;药剂明显延长幼虫5龄期,处理试虫比对照蜕皮滞后约1.5天;处理试虫在5龄末期出现蜕皮异常:约有10%~20%的处理试虫由于不能蜕去头壳、胸部或胸腹表皮而导致死亡。2.脱氧鬼臼毒素对试虫体壁主要成分有较大影响:经药剂处理后,五龄中期和六龄初期处理试虫体壁总脂肪量均少于同期对照,但相对含量(表皮干重百分比)却为同期对照试虫的3.6倍和1.8倍,蛋白质相对含量分别是同期对照试虫的63.3%和75.0%。对照和处理试虫几丁质含量的差异不显著。3.脱氧鬼臼毒素对试虫表皮中五类蛋白质都有不同程度的影响:药剂改变试虫表皮蛋白质含量,对水溶性非结合蛋白、氢键结合蛋白和共价键结合蛋白含量的影响大于弱键结合蛋白和电价键结合蛋白。4.脱氧鬼臼毒素可改变试虫表皮水溶性蛋白和氢键结合蛋白组分,对弱键结合蛋白组分影响不大。与对照相比,药剂使处理试虫水溶性蛋白中出现了一种新蛋白组分,使氢键结合蛋白缺少了两种正常的蛋白组分;药剂使试虫表皮水溶性蛋白和氢键结合蛋白的沉积和消化回吸过程滞后。5.与对照相比,处理试虫体壁酚氧化酶活性表现为5龄初期被激活,5龄中后期被抑制,6龄初期又被激活的变化过程;几丁质酶活性表现为先被抑制,后被激活的变化过程;氨基酸组分分析发现,处理试虫表皮氨基酸除脯氨酸外,其余全部受到抑制,其中半胱氨酸的抑制率最高,达到24.6%,缬氨酸、甲硫氨酸和异亮氨酸的抑制率分别达到22.3%、17.0%和11.7%;体壁核酸测定结果表明,试虫体壁DNA在五龄中期表现为抑制,抑制率为29.3%,在六龄初期被激活,激活率为17.2%,RNA在两阶段均表现为被抑制,RNA/DNA比值下降。6.通过上述研究,初步推断脱氧鬼臼毒素对粘虫体壁影响作用机制为:脱氧鬼臼毒素抑制RNA→使RNA/DNA比值下降→干扰了表皮蛋白的合成和消化回吸过程→影响了表皮蛋白的组分及含量→改变几丁-蛋白复合体性质→改变生理状态:出现超龄幼虫、幼虫-蛹中间型、表皮变薄破裂,其他各种生理状态异常→死亡。
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