本文对红笛鲷人工感染溶藻弧菌后的病变组织结构进行显微观察，研究了组织结构的病理变化。10％中性福而马林固定，石蜡包埋，5-7um切片，常规HE染色，显微镜观察。结果表明，注射溶藻弧菌后的红笛鲷表现出一系列临床症状：体表充血，体色发白，平衡能力低，运动迟缓，注射部位出现红肿，腹部膨大，打开腹腔可见明显的积水，肝脏出血，脾脏肿大，肠道内无食物。取刚刚死亡或者濒临死亡红笛鲷的肝脏、脾脏、肠、心脏等组织制备病理组织切片，显微观察发现这些组织均发生病变，其中尤以肝脏和脾脏病变最为明显。肝脏出血，肝索中有红细胞浸润，部分肝细胞坏死，解体；脾脏中细胞结构不明显，细胞坏死，；肠粘膜上皮细胞脱落、坏死，微绒毛模糊不清。对溶藻弧菌注射红笛鲷后的主要病理组织进行取样，10％中性福而马林固定，冰冻切片，ABC免疫组化检测，结果表明，所检组织(肝、脾、肠)中均有大量棕黄色阳性颗粒出现，表明溶藻弧菌已侵染红笛鲷各个组织并在各个组织大量繁殖，而未注射溶藻弧菌的健康红笛鲷则无阳性颗粒出现或很少。参照上述研究及检测结果，从基因库中获取溶藻弧菌的胶原蛋白酶和外膜蛋白基因序列，根据基因的保守性用DNAStar分别设计两对引物，分别进行PCR扩增，然后对该特异DNA片段进行克隆、测序，与Genbank里已知的溶藻弧菌胶原蛋白酶基因序列和外膜蛋白基因序列进行同源性比对，根据比对结果将回收的特异DNA片段通过地高辛标记制备成探针。分别应用溶藻弧菌的胶原蛋白酶DNA探针和外膜蛋白DNA探针，对实验室保种的溶藻弧菌以及鱼排分离的溶藻弧菌进行斑点杂交检测。检测结果表明，胶原蛋白酶基因探针与保种的溶藻弧菌以及鱼排分离的溶藻弧菌DNA产生较强的阳性反应，而与霍乱弧菌、哈氏弧菌和副溶血弧菌DNA等均无阳性反应，表明该胶原蛋白酶DNA探针的特异性较强；而外膜蛋白基因探针与保种的溶藻弧菌以及鱼排分离的溶藻弧菌DNA产生较强的阳性反应，但与哈氏弧菌和副溶血弧菌DNA也出现了较强的阳性反应，与霍乱弧菌DNA则无阳性反应，表明该外膜蛋白。DNA探针的特异性较低。因此本文构建的溶藻弧菌胶原蛋白酶DNA探针斑点杂交检测方法，特异性强，简便易行，为溶藻弧菌的快速诊断提供一种新的检测方法。