目的:1.探讨HBx转染对肝癌细胞系mRNA和lncRNA表达谱的影响。2.从肝癌细胞系HepG2和Huh7中筛选受HBx调控趋势相反的lncRNA。3.探讨HBx相关lncRNA-ENST00000582866对肝癌细胞HepG2侵袭迁移的影响并找寻其潜在靶点。方法:1.采用瞬时转染技术将HBx转入肝癌细胞中,以构建HBV感染肝癌细胞模型。2.基于RNA-Seq分析转染前后mRNA和lncRNA表达水平,并对差异表达基因进行KEGG和GO富集分析。3.对转染前后HepG2和Huh7组细胞中的lncRNA表达谱进行重合分析,筛选在两组肝癌细胞中受HBx调控趋势相反的lncRNA。4.采用基因过表达技术和小分子RNA干扰技术过表达或降低ENST00000582866在肝癌细胞中的表达水平。5.基于生物信息学预测ENST00000582866潜在靶点,并使用q-PCR技术对靶点进行验证。6.采用Transwell侵袭和划痕运动实验观察ENST00000582866对肝癌细胞侵袭及迁移的影响。结果:1.RNA-Seq检测本次HBx转染可引起HepG2细胞内554条mRNA和10条lncRNA表达失调,Huh7细胞内508条mRNA和62条lncRNA表达失调。2.筛选出8条lncRNA在两种不同系肝癌细胞HepG2和Huh7中受到HBx的调控趋势相反。3.Transwell侵袭实验结果显示ENST00000582866过表达组中细胞数明显减少,而siRNA-ENST00000582866组中细胞数明显增多。划痕实验显示ENST00000582866过表达组中的迁移距离明显缩短,而siRNA-ENST00000582866组中的迁移距离明显增长。4.PLK1在ENST00000582866过表达组中的表达量明显增高,而在siRNA-ENST00000582866组中表达量明显降低。结论:本研究将HBx转染肝癌细胞系HepG2和Huh7,分析mRNA和lncRNA表达谱差异,初步验证HBx相关lncRNA-ENST00000582866可抑制肝癌细胞侵袭迁移能力,可能是ENST00000582866上调PLK1表达,而发挥抑制肝癌细胞侵袭迁移能力。本实验结果为肝癌的分子治疗提供新的有效信息。