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大量研究表明,阿片类药物滥用通过破坏免疫系统固有免疫和适应性免疫进而引起免疫抑制。然而,阿片类药物滥用增加肺炎链球菌肺部易感性的确切机制目前还不明了。白细胞介素- 23(IL-23)是由激活的巨噬细胞和树突状细胞(DCs)分泌,并诱导记忆性T细胞增殖,是机体响应细菌的挑战时T细胞表达白细胞介素- 17(IL-17)的关键因素。IL-23/IL-17轴在肺炎链球菌肺部感染过程是否有助于调节固有免疫还没有得到明确阐述。阿片类药物吗啡调节肺炎链球菌引起IL- 23产生的细胞和分子机制也有待澄清。本研究使用已建立的阿片类药物滥用和肺炎链球菌肺部感染的小鼠模型与细胞感染模型,采用ELISA、Real time PCR、Western blot、流式细胞术、免疫荧光技术、瞬时转染等免疫学与分子生物学技术,在整体、细胞与分子水平研究了阿片类药物吗啡对肺炎链球菌感染模型固有免疫的调节及机制。采用阿片类药物滥用和肺炎链球菌肺部感染的鼠体内模型,发现了吗啡能削弱IL-23/IL-17早期产生与中性粒细胞迁移延迟和细菌清除减少有关;给予鼠重组IL-17蛋白明显的改善了宿主肺部的抗菌能力并降低了细菌散播到血液中;使用TCRδ-/-鼠实验显示IL- 17水平降低,机体清除感染的能力下降;肺炎链球菌感染早期,吗啡可抑制抗菌蛋白质S100A9和S100A8/A9的分泌。这些结果表明吗啡能引起产生IL-23的DCs和产生IL-17的γδT淋巴细胞的功能紊乱,并导致S100A9和S100A8/A9分泌减少,中性粒细胞募集受损以致引起更严重感染。用肺炎链球菌体外细胞感染模型,我们发现用肺炎链球菌、脂磷壁酸和肺炎链球菌溶血素刺激后的骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)和巨噬细胞(BMDMs)IL-23蛋白水平显著增加。在BMDCs,吗啡能显著抑制感染诱导的IL-23启动子活性、mRNA和蛋白质水平;脂磷壁酸和胞壁酰二肽联合诱导产生的IL–23与感染诱导的水平相同;用MyD88和IRAK1/4抑制剂,或TLR2抗体预处理后,感染诱导的IL- 23水平明显减少,并且吗啡的抑制作用消除;吗啡能抑制感染诱导的IRF-3、ATF-2和NF-κBp65的磷酸化。这些结果表明吗啡能够削弱肺炎链球菌诱导DCs产生IL-23,这种削弱是通过MyD88-IRAK1/4依赖性的TLR2和Nod2协同的信号传导通路来实现的。本研究为发展治疗、干预和控制药物滥用人群肺炎链球菌感染提供了重要理论基础和新颖的方法依据,具有重要的生物学意义和潜在临床应用价值。此项目的长期目标是深入了解调节肺部天然免疫的确切分子机制,以便发展新的有效的辅助疗法来完善标准的治疗方法,提高阿片类药物滥用者的机体免疫功能和肺部抗感染能力。