从神经肽类物质及LPS信号通路的相关性研究分析“肺与大肠相表里”的内涵意义

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“肺与大肠相表里”该理论观点本源于《黄帝内经》,是中医学的基本理论之一。几千年来人们对这一理论不断进行深入探讨和挖掘,使得该基础理论从理论内涵到临床不断取得新的发展,对指导中医临床起到了非常重要的作用。近年来,一些学者对该观点进行了更加深入地研究:从中医基础理论到临床;从现代分子生物、免疫学、胚胎学和内分泌学等不同方面探讨了肺与大肠相关的科学内涵。由于肺与大肠生理上有一样的的结构基础,并且在神经、体液、激素的调控下彼此影响,而且在病理上也可互相传变。“肺与大肠相表里”该理论具备特定的生物学基础和组织同源性。临床上可根据“肺与大肠相表里”这个理论制定不同的的治法:有“肺病治肠”、“肠病治肺”和“肺肠同治”,比“肺病治肺”、“肠病治肠”,临床效果更佳。“肺与大肠相表里”这一古老的理论在现代医学的研究下,有了更多的新意和更多的理论内涵,并能更好地指导临床实践。1研究目的本研究首先通过文献研究进一步探讨与分析了“肺与大肠相表里”的丰富理论内涵,并在该理论的指导下,对大鼠肺、肠组织之间的关系和有关的信号通路物质的表达进行分析,以便从该角度得到肺与大肠相关的新的物质支持,进一步丰富“肺与大肠相表里”的科学理论内涵,为中医藏象理论的现代研究提供新的方法和思路。本研究的实验一从“肠病及肺”和“肺病及肠”角度出发,建立肠病动物模型及肺病动物模型,观察造模后大鼠在一般行为表现、肺与大肠中MYD88、IRAK和TRAF6这些LPS信号分子是否有一定的协同识别以探寻“肠病及肺”或是“肺病及肠”的传变节点及其病理传变机制。本研究的实验二以中医脏腑理论“肺与大肠相表里”为指导思想,建立肺病动物模型与肠病动物模型,分别选取二个不同时间点(第8天、第16天)观察肺肠组织共有的相关活性物质SP、VIP、iNOS、CGRP的表达与关联,进一步深入探求“肺与大肠相表里”的病理实质。2研究方法2.1文献研究该论文首先运用文献学方法对古代临床文献有关脏腑相关理论进行梳理,及其中把“肺与大肠相表里”的相关内容作为重点进行整理,并从中西医学的角度对肺与大肠在生理、病理以及实验和临床方面的相关性研究理论作了分析,为解释肺系疾病和肠系疾病在发病过程中的关联性,对“肺与大肠相表里”的物质基础作进一步阐释,不仅丰富了“肺与大肠相表里”的理论内涵,而且对于临床有一定的指导性意义。2.2实验研究2.2.1肺与大肠MYD88、IRAK、TRAF6等LPS信号通路的实验研究选用健康雌性SD大鼠共45只,每只大鼠体重在110-120g之间,随机分为五组:正常组、限食组、限水组、高氧组和低氧组。自然光照,温度24℃-26℃,湿度40%-60%下饲养七天后处死后并取五组大鼠的肺、空肠、回肠、结肠组织用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测五组大鼠的各个组织中MYD88、IRAK、TRAF6的含量。2.2.2肺与大肠神经肽物质相关性实验研究选用两批健康雌性SD大鼠,每只大鼠体重在110-120g之间,每批35只。随机将每批的35只大鼠分为5组,均为正常组、限食组、限水组、高氧组和低氧组。自然光照,温度24℃-26℃,湿度40%-60%下饲养8天和16天后分别处死后取五组大鼠的肺、脾、肝、膀胱、肾脏、血清、胃、心脏、空肠、回肠、结肠、直肠组织,用ELISA试剂盒(酶联免疫试剂盒)检测五组大鼠的各个组织中CGRP、iNOS、SP和VIP等物质的含量。3研究结果3.1实验一的结果空肠:限食组的MYD88平均水平较正常组降低(p<0.05),高氧组的MYD88平均水平较限食组升高(p<0.05),高氧组的MYD88平均水平较限水组也升高(p<0.05)。空肠:高氧组的IRAK平均水平较其他各组均升高(p<0.05),低氧组的IRAK平均水平较限水组有所升高(p<0.05)。结肠:限水组、高氧组和低氧组的TRAK6平均水平较正常组相比均有降低(p<0.05),高氧组低于限食组(p<0.05);空肠:高氧组TRAF6平均水平高于正常组、限食组和限水组(p<0.05)。其余组间两两比较差异无统计学意义(p>0.05)。3.2实验二结果五组间各个组织、不同时间点的CGRP平均水平差异均无统计学意义。五组间膀胱第16天的iNOS含量经两两比较可知,限食组高于限水组和低氧组;胃在第8天的SP含量经两两比较可知,限食组高于正常组;脾在第8天的VIP的含量经两两比较可知低氧组的平均水平分别高于正常组、限食组、限水组及高氧组,其余组间两两之间差异均无统计学意义。在CGRP这个指标有关联的组织有:肺和心脏(第八天)、肺和空肠(第十六天)、肾和膀胱(第八天)、脾与肝(第十六天)、心与回肠(第十六天);在iNOS这个指标有关联的组织有:肺与膀胱(第十六天)、心与直肠(第十六天);在SP这个指标有关联的组织有:肺与肝(第八天和第十六天)、肺与回肠、结肠(第八天)、脾与胃(第八天)、心脏和回肠(第八天);在VIP这个指标有关联的组织有:肺和肝(第八天)、心脏和结肠(第八天和第十六天)。4研究结论实验一证明了肺病模型(高氧组)中的空肠TRAF6和IRAK较正常组均有所增高,为“肺病及肠”这个假说提供了实验论据,可以说明肺和大肠在炎症的发生过程中存在着密切的关系。实验二可以看出在四个神经肽物质的变化中,我们可以见到肺组织中在SP指标中是和回肠、结肠有关联,在CGRP这个指标上是和空肠有关联,在iNOS指标上是和膀胱有关联。在CGRP和SP这两个指标中,都得出了心与回肠有关联的结论;在iNOS指标下发现心与直肠有关联;在VIP指标下发现心与结肠有关联,由此可见心脏与肠道之间的联系还是很密切的,这也提示我们心与小肠相表里亦有一定的科学依据,这也是今后研究的一个方向。
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