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中药免疫增强剂的开发是现代中药学和免疫学的研究热点,本研究旨在通过一系列体内外试验研制开发一种疗效确实的中药免疫增强剂。(1)复方的筛选及对小鼠非特异性免疫功能的影响通过小鼠体内试验,从六个中药复方中筛选有效的中药免疫增强剂。结果表明:复方A能显著增加小鼠的负重游泳时间,比对照组提高20-27.5%;复方B能显著增加小鼠的负重游泳时间、单核细胞数量、补体总活性,比对照组分别提高28.4-39.5%、2.8-94.4%和0.8%-39.9%;复方C能显著增加小鼠的负重游泳时间、白细胞数量、中性粒细胞数量、单核-巨噬细胞吞噬活性、LZM酶活力、血清中IFN-α含量,比对照组分别提高6.4-25.0%、2.4-89.6%、12.2-27.9%、4.1-23.4%、45.8-65.0%和18.0-40.6%;复方D能显著增加小鼠的负重游泳时间、白细胞数量、淋巴细胞数量、单核细胞数量、中性粒细胞数量、单核-巨噬细胞吞噬活性、LZM酶活力,与对照组相比能够分别提高22.6-39.5%、15-94.8%、11.1-111.1%、56-88%、8.7-107.5%、5.7-34.3%和9.84-233.9%;复方E能显著增加小鼠的负重游泳时间、白细胞数量、淋巴细胞数量、单核细胞数量、中性粒细胞数量、单核-巨噬细胞吞噬活性、LZM酶活力,与对照组相比能够分别提高15.8-25.6%、5.2-110%、2.7-88.4%、10-132%、18-114.1%、6.2-26.9%和108.4-152.3%;复方E能显著增加小鼠的负重游泳时间、免疫器官指数、LZM酶活力、补体总活力,与对照组相比能够分别提高9.6-35.6%、31.3-108.4%、39.7-166.7%、7.1-8.4%。综合分析,选择复C作为“增康灵”的最佳处方。(2)对特异性免疫功能的影响研究“增康灵”对新城疫疫苗和猪瘟疫苗免疫效果的影响:将试验动物分成高、中、低三个剂量组和一个空白对照组,检测血清中的抗体效价水平。结果表明:鸡在第一次接种NDV疫苗后,高剂量组的抗体效价在12d后达到峰值,效价水平在100以上的持续时间达7d;在第二次接种后,高剂量组在10d后达到峰值,效价水平在100以上的持续时间达21d。仔猪在接种猪瘟疫苗后,各试验组在2w后抗体效价达到峰值,血清OD值大于0.4(抗体水平)的持续时间以高剂量组最长,达5w。提示“增康灵”能显著提高动物的特异性免疫功能。(3)体外抗菌试验用试管法测得“增康灵”对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为875μg·mL-1、218.75μg·mL-1、437.5μg·mL-1、875μg·mL-1;最低杀菌浓度(MBC)分别为875μg·mL-1、437.5μg·mL-1、875μg·mL-1、875μg·mL-1。表明“增康灵”具有一定的体外抗菌作用。(4)体外抗病毒试验:用先接种病毒后加药物、先加药物后加病毒、病毒和药物体外作用2小时后再同时加入三种方式测定“增康灵”的体外抗PRV效果,通过观察PRV引起的PK-15细胞病变,用Reed-Muench法计算“增康灵”对PK-15细胞的最大无毒浓度(TDo)为138.6μg/mL、半数中毒浓度(TDso)为353.6μg/mL、抑制50%细胞病变的药物浓度(IC50)分别为2.8、5.5、12.8μg/mL、治疗指数(TI)分别为:126、64、28。提示:“增康灵”具有一定的体外抗病毒作用。研究表明:“增康灵”能显著提高动物机体免疫功能,也有一定的抗菌、抗病毒作用,是一种具有多重药理活性的免疫增强剂。