水飞蓟属于菊科植物,在水飞蓟的植株以及种子中含有一种天然黄酮类化合物,其中在种子中含量最高。近些年,在实验室中对水飞蓟素的研究主要在于研究水飞蓟素的主要单体化合物水飞蓟宾的分离纯化以及生理活性,但是对于其他单体化合物特别是如水飞蓟亭,水飞蓟宁等研究比较少,同时,在近些年的研究中水飞蓟素的提取工艺常用溶剂提取法,提取需要溶剂多,成本非常高,同时对环境的污染大,并且对于水飞蓟素的生理功能研究主要集中以水飞蓟素的对于肝脏系统的保护功能为研究热点,对其他功能活性研究非常少。以上的这些问题都在工艺技术以及生理活性的研究上阻碍了水飞蓟素的发展,所以,在水飞蓟素研究方面建立方便快捷的提取方式和分离纯化方式,以及完善在其他生理活性方面的研究具有非常重要的实际意义。主要结论如下：1、对水飞蓟壳中的水飞蓟素进行酶法辅助提取,水飞蓟素最佳提取条件,应用纤维素酶法辅助提取水飞蓟壳中水飞蓟素,酶浓度为30U/mL、酶解温度为45℃、酶解时间为12Omin、pH值为4.5,灭酶后,回流提取1h,水飞蓟素提取率为7.86%,比相同时间内传统溶剂提取法提取率提高了74.67%。2、应用HPD-600型大孔吸附树脂和200-400目硅胶分离纯化水飞蓟素中的主要单体化合物,分别用70%乙醇溶液和石油醚-丙酮溶液洗脱,用红外光谱、液相色谱-质谱串联技术(LC-MS)和核磁共振谱鉴定水飞蓟素单体的结构,结果如下：石油醚-丙酮2：1部分洗脱出1个黄酮类化合物,经鉴定为花旗松素,从石油醚-丙酮1：1部分洗脱出1个黄酮类化合物,经鉴定为水飞蓟宁,石油醚-丙酮1：2部分洗脱出3个黄酮类化合物,经鉴别分别是水飞蓟宾和水飞蓟亭。3、水飞蓟素在体内和体外的抗氧化活性进行研究,再体外抗氧化试验结果中表示,在超氧阴离子自由基清除率、羟基自由基清除率等不同的清除自由基实验中,水飞蓟亭与水飞蓟宁的清除自由基活性都是最高的,水飞蓟宾的抗氧化活性相比下比较低。在体内抗氧化试验过程中,水飞蓟素各剂量的血清T-SOD、肝脏T-SOD、血清T-AOC、肝脏T-AOC、血清CAT活性、肝脏CAT活性、血清GSH-Px口肝脏GSH-Px含量逐渐上升,而血清MDA和肝脏MDA含量随着试验周期的变化逐渐下降,试验结果显示：各个剂量的水飞蓟素可提高抗氧化酶类在血清和肝脏中的含量和活性,通过减少过氧化物在生成来提高抗氧化活性。4、水飞蓟素免疫调节活性研究,试验结束时,各剂量组的肝脏ACP活性、血清ACP活性、溶菌酶活性、一氧化氮含量、脾指数、摊廓清指数、吞噬指数和胸腺指数随着试验周期的延长逐渐升高,且呈剂量依赖型增长。试验结果表明：水飞蓟素高剂量组能提高脾指数和胸腺指数、血液ACP活性、肝脏的ACP活性以及溶菌酶的含量,从而增强吞噬细胞对其他物质的吞噬和吸收的能力,而且水飞蓟素高剂量组能显著提高小鼠的碳廓清指数(K)和吞噬系数(Q),所以,水飞蓟素高剂量组能够增强生物机体的非特异性免疫机能；水飞蓟素高剂量组能够提高血液中一氧化氮的含量,表明水飞蓟素可通过活化巨噬细胞进行免疫活动。5、水飞蓟素抗疲劳活性研究,试验结束时,与对照组相比,各剂量组小鼠实验体重和各器官重量无显著性差异(P>0.05),在抗疲劳试验过程中,各剂量组水飞蓟素小鼠的爬杆时间、力竭游泳时间、肝糖原和肌糖原含量逐渐升高,而血乳酸BLA和血清尿素氮BUN含量逐渐减低,同时,水飞蓟素对小鼠肝脏(AST,ALT和白蛋白),胆管功能(ALP和总胆红素),心脏健康量表(LDH),肌肉功能(CK),肾功能(肌酐和尿酸),营养状况(总蛋白),和血脂水平(TC和TG)没有显著的副作用。通过对以上分析,水飞蓟素对小鼠的运动过程中的疲劳过程起到了十分有利的作用,抗疲劳损伤效果十分显著,表明对于肌细胞长时间的运动损伤具有保护作用,并且可以升高相关酶活性和运动小鼠骨骼肌内的能量代谢,促进细胞中的有氧代谢。并且以水飞蓟素高剂量组产生的抗疲劳作用效果最好。运动前后的石蜡切片显示,水飞蓟素对于小鼠心肌和骨骼肌由于长时间运动所导致的细微结构的损伤具有减轻的作用。但是对于水飞蓟素能够缓解疲劳的机理还不是十分明确,需要进行更加深入的研究。