目的:(1)探讨妊娠期慢性应激是否通过子代海马神经元内质网应激,激活PERK,促使e IF2α磷酸化,引起BACE1 m RNA翻译增加,最终导致BACE1蛋白含量增加,从而促进Aβ的生成。(2)通过给予维生素D并检测子鼠海马组织GRP78、磷酸化的PERK、磷酸化e IF2α蛋白水平。探讨维生素D对妊娠期慢性应激促进子代海马内质网应激是否有抑制作用。方法:以6个月龄的子代APPswe/PS1d E9双转基因小鼠为研究对象,实验小鼠随机分成4组,即产前慢性应激-子代慢性应激组(CPS+COS)、产前慢性应激-子代正常处理组(CPS)、产前正常处理-子代慢性应激组(COS)、产前正常处理-子代正常处理组(对照组)。对于4组的子代小鼠,运用ELISA法测定Aβ1-40和Aβ1-42水平;通过HE染色观察海马CA3区神经元的组织病理形态;采用Morris水迷宫检测空间学习记忆能力;采用荧光酶标记法检测BACE1的活性;采用Western blot法定量检测小鼠海马组织中GRP78、p-e IF2α、淀粉样前体蛋白β位点裂解酶1(BACE1)以及p-PERK的表达量;运用免疫组化的方法,定位、半定量检测海马CA3区葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达状况。在上述实验的基础上,将小鼠随机分为CPS+COS和产前慢性应激-子代慢性应激组-VD灌胃组(CPS+COS+VD)两组,这两组的子代小鼠,采用Y迷宫检测子代小鼠的辨别性工作记忆及参考记忆;采用Western blot法定量检测小鼠海马组织中GRP78、p-e IF2α以及p-PERK的表达量;运用免疫组化的方法,定位、半定量检测海马CA3区GRP78的表达状况。结果:1.ELISA结果显示COS组海马组织Aβ1-40和Aβ1-42表达量较对照组明显增加(P<0.05),CPS+COS组海马组织Aβ1-40和Aβ1-42表达量较COS组明显增加(P<0.05)。2.HE染色结果显示COS组小鼠海马CA3区损伤的神经元排列疏松紊乱,细胞体略小,核浓染固缩,神经元数目较对照组明显增多(P<0.05);CPS+COS组小鼠的海马CA3区损伤的神经元数目较COS组进一步增多(P<0.05)。3.水迷宫结果显示COS组小鼠的逃避潜伏期时间和游泳距离较对照组延长(P<0.05)、平台象限游泳时间和穿越平台次数较对照组减少(P<0.05);CPS+COS组小鼠的逃避潜伏期和游泳距离较COS组明显延长(P<0.05)、平台象限游泳时间和穿越平台次数较COS组明显减少(P<0.05)。4.荧光酶标法检测结果显示,各组子代鼠海马组织BACE1活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。5.Western blot结果显示COS组小鼠海马组织GRP78、p-e IF2α、p-PERK和BACE1蛋白的表达量较对照组明显升高(P<0.05);CPS+COS组小鼠海马组织GRP78、p-e IF2α、p-PERK和BACE1的表达量较COS组明显升高(P<0.05)。6.免疫组化结果显示,COS组小鼠海马CA3区组织GRP78蛋白的表达量较对照组升高(P<0.05);CPS+COS组小鼠海马CA3区组织较COS组有更多的GRP78的表达(P<0.05)。7.Y迷宫结果显示,CPS+COS+VD组子代鼠进入各臂的次数和进入新臂的时间较CPS+COS组多。8.HE染色结果显示CPS+COS+VD组小鼠海马CA3区神经元排列紧密,神经元数目较CPS+COS组增多,核浓染固缩较CPS+COS组有所减少。9.Western blot和免疫组化结果显示,CPS+COS+VD组的GRP78、p-e IF2α、p-PERK蛋白的表达量较对照组明显减少(P<0.05)。结论:1.妊娠期慢性应激可以通过子代长期升高的GCs,引起海马神经元内质网应激,激活PERK,引起e IF2α磷酸化,促进BACE1 m RNA翻译增加,导致BACE1蛋白水平或活性升高,从而促进Aβ的生成,引起或促进淀粉样斑块的形成。2.适度的增补维生素D对妊娠期慢性应激促进子代海马神经元内质网应激有抑制作用。