拟南芥MicroRNA160a基因调控种子萌发和幼苗生长

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MicroRNA(miRNA)是一种由植物体内源基因编码的大小约为21-25nt的非编码单链小RNA,它在植物体内作为基因的调控者,通过与靶基因转录的mRNA互补配对来降解或抑制mRNA的翻译,从而参与基因转录后水平调控,对于植物正常的生长发育起着非常重要的作用。拟南芥中(Arabidopsisthaliana)的MicroRNA160(miR160),已被证明可以直接调控生长素响应因子(auxinresponsefactor,ARF)ARF10、16和17,参与调控植物根冠、叶片和花的发育。但miR160在植物种子萌发和幼苗生长中的作用并没有被研究,高等植物中,种子的萌发和幼苗生长又关系到物种的延续,在植物发育过程中起着至关重要的作用。因此研究MicroRNA160a在植物种子萌发和幼苗的生长,有利于进一步阐明研究miR160的功能,以及三个生长素响应因子在种子萌发和幼苗长中的调控作用。  在拟南芥中已发现MIR160有三个编码基因MIR160a、MIR160b和MIR160c,我们通过Ds插入的方法得到了MIR160a的突变体abs1。在种子萌发方面,我们发现拟南芥MIR160a基因缺失突变体abs1在种子萌发在正常条件下没有延迟表型,但在脱落酸(ABA)处理下,较低浓度的ABA可以延迟abs1的萌发,如在1μΜABA处理下,abs1在第二天和第三天几乎不能萌发,在第七天也只有15%左右,而野生型Col-0却达到90%以上。在幼苗发育阶段,同样在低浓度的ABA处理下有明显的表型,在1μΜABA的培养基上几乎不能长出绿色子叶或者长出叶片后幼苗也不能正常生长,而野生型Col-0却生长正常。结果说明abs1参与调控了拟南芥种子的萌发和幼苗的生长。进一步的研究结果表明,在Ler背景下过表达MIR160a的转基因植物35S::160a-8在种子萌发和幼苗生长方面弥补了MIR160a基因缺失导致的表型缺陷。在1μΜABA处理下,过表达材料35S::160a-8的萌发率比Ler要高。在幼苗生长方面,35S::160a-8在ABA处理下的表型比Ler也要强,能够长出绿色的叶子和幼苗,并且对ABA的敏感性更低。再次证明了MIR160a参与了种子萌发和幼苗生长中的调控,而且我们推测MIR160a可能参与了ABA的信号转导。同时实验中我们发现了abs1的主根长和下胚轴长在正常条件下和吲哚乙酸(IAA)处理下,都比野生型Col-0要长,因此我们推测abs1主根长和下胚轴长的表型可能是MIR160a参与调控生长素的表达的结果。我们用转基因植物P160a::GUS研究MIR160a在拟南芥中的表达特征,结果发现MIR160a在拟南芥的叶片和根中均有表达,但其表达不受IAA、2,4-D的诱导调节。实验结果说明了MIR160aa虽然参与了生长素的调控,但不受生长素的诱导。本文就MIR160a参与ABA和生长素的信号调控进行了讨论。
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