【摘 要】
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由尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f.sp cubense,FOC）引起的香蕉枯萎病,给国内外迅猛发展的香蕉产业造成最严重的损失。其中由4号生理小种（FOC4）所引起的香蕉枯萎病,对香蕉种植业的危害最为严重,至今仍然没有找到长期有效能够很好的控制该病害的流行发生的防治方法。目前,较为理想、应用前景较好的措施是抗病育种和生物防治。本研究对前人从土壤中分离筛选得到的对FOC
【基金项目】
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国家香蕉产业技术体系建设专项（CARS-09）；
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由尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f.sp cubense,FOC）引起的香蕉枯萎病,给国内外迅猛发展的香蕉产业造成最严重的损失。其中由4号生理小种（FOC4）所引起的香蕉枯萎病,对香蕉种植业的危害最为严重,至今仍然没有找到长期有效能够很好的控制该病害的流行发生的防治方法。目前,较为理想、应用前景较好的措施是抗病育种和生物防治。本研究对前人从土壤中分离筛选得到的对FOC4具有明显抑制作用的解淀粉芽孢杆菌ZJ6-6,进一步开展了该生防菌对香蕉枯萎病的生防特性研究,以希将环境友好型的生防细菌和香蕉抗病品种等综合应用于香蕉枯萎病的防治,从而为提高该生防菌对香蕉枯萎病的防效提供相关的理论依据。具体研究结果如下:1、不同p H梯度（p H值分别为4.2、5.2、6.2、72、8.2）培养条件下,ZJ6-6的发酵液与FOC4的平板抑菌活性实验结果表明:（1）在p H为4.2时,ZJ6-6几乎不能进行正常的生长繁殖,所得发酵液对FOC4没有抑制作用。（2）其他几个p H梯度培养条件下的抑菌效果表现依次为:6.2>5.2>7.2>8.2。（3）在p H值为6.2条件下抑菌率达31.92%。通过实时荧光定量PCR对ZJ6-6的srf AB、fen D、itu D 3个生防基因在不同p H条件下、不同时间点的表达量进行测定,结果表明:（1）三个生防基因在同一时间点、不同p H条件下的表达量明显不同。（2）生防基因srf AB、fen D在不同p H条件下均在培养16 h左右达到最大值;而itu D在培养24 h左右达到最大值。（3）在p H值6.2时,三个生防基因在不同时间点的表达量均较高。2、平板活性检测不同温度梯度（温度25℃、28℃、31℃、34℃、37℃）条件下,ZJ6-6的发酵液对FOC4菌丝生长的抑菌活性,结果表明:（1）不同温度条件下,其抑制效果不同,在温度为31℃时,抑菌效果最好（抑菌率26.77%）。（2）在温度37℃时,抑菌作用较低,其他三个温度梯度的抑菌效果差异不显著。不同温度条件下发酵液对FOC4孢子萌发的抑制实验结果表明:在不同温度条件下,ZJ6-6发酵液对FOC4孢子萌发抑制率与平板抑菌活性实验结果基本一致,且在温度为31℃条件下的孢子萌发抑制率达75.31%。3、土壤定殖实验结果表明:（1）Rif ZJ6-6在不同处理大田土壤中的定殖量依次表现为:未灭菌+植株>灭菌>未灭菌;其中,在未灭菌+植株处理、灭菌处理中的定殖量,分别在1.82×105cfu/m L～1.21×105cfu/m L的水平间保持动态平衡;但在未灭菌处理中的含量呈不断下降趋势含量在5×104cfu/m L水平。（2）Rif ZJ6-6在不同处理的基质土壤中的定殖量也明显不同,其在灭菌处理的土壤中的定殖效果最好,最高达7.20×105cfu/g,呈先上升后下降,然后保持相对稳定的动态平衡;在另外两个处理土壤中均比灭菌处理的含量要低,也呈先上升后略下降后均在2×105cfu/g的水平保持相对动态平衡。4、盆栽定殖实验结果表明:（1）Rif ZJ6-6在抗感品种植株中的根和球茎的含量维持在102 cfu/m L的水平,但在假茎中均未检测到Rif ZJ6-6的定殖。（2）Rif ZJ6-6在不同品种不同部位的定殖能力表现为:南天黄根>巴西蕉根>南天黄球茎>巴西蕉球茎,且在香蕉抗病品种南天黄比在感病品种巴西蕉中的植株体内的定殖能力要好。5、盆栽促生实验结果表明:香蕉抗病和感病品种的茎粗、株高、鲜（干）重、叶绿素等植株生长相关性状,相较于无菌水对照组均明显增加,揭示Rif ZJ6-6对香蕉具有显著的促生作用;且对香蕉抗病品种南天黄,比对感病品种巴西蕉的促生效果要好。6、盆栽防效实验结果表明:（1）同时接种Rif ZJ6-6和FOC4,对香蕉抗和感病的品种防效均不明显,在接种14 d后,相对防效分别为45.48%和33.19%;在接种28 d后,相对防效分别为20.44%和18.67%。（2）对抗病品种南天黄,先接种Rif ZJ6-6,3天后再接不同浓度FOC4后,其相对防效明显提高,且病原菌接种浓度越低,其防效越好。综上结果表明,采取先接种生防菌3天后再接种病原菌,能够有效提高ZJ6-6对香蕉枯萎病菌的防效。
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