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目的：研究益气化瘀补肾法中药及其拆方对失神经支配创面修复的影响，探讨益气化瘀补肾法中药及其拆方促进失神经支配创面愈合的作用机制。
方法：通过背部皮下注射辣椒素联合外科手术法建立失神经支配创面模型，分别观察益气化瘀补肾法中药（益气化瘀补肾组）及拆方组（益气化瘀组、补肾组）、弥可保组、失神经支配创面模型组（模型组）、正常组各组创面的愈合情况，并应用RT-PCR、免疫组化、图像分析、免疫荧光、ELISA、Western blot技术从基因和蛋白水平上检测各组创周新生组织中SP、CGRP、VEGF、NF的mRNA表达、蛋白含量，免疫荧光技术观察皮肤神经形态改变，图像分析方法观察成纤维细胞、新生血管的数目变化。
结果：
1.创面愈合情况：造模后第7、10、14天模型组创面愈合率明显低于正常组（P＜0.01）。第10、14天各治疗组创面愈合率高于模型组(P＜0.01，P＜0.05)；益气化瘀补肾组创面愈合率明显高于弥可保组(P＜0.01)。益气化瘀补肾组创面愈合率高于各拆方组(P＜0.05，P＜0.01)。模型组创面愈合时间明显长于正常组(P＜0.01)。益气化瘀补肾组、益气化瘀组、补肾组及弥可保组创面愈合时间明显短于模型组（P＜0.01）；益气化瘀补肾组创面愈合时间明显短于弥可保组(P＜0.01)。益气化瘀补肾组比益气化瘀组、补肾组创面愈合时间明显缩短（P＜0.01）。
2. SP结果：Western blot模型组SP水平明显低于正常组（P＜0.01）；益气化瘀补肾组、补肾组SP水平高于模型组(P＜0.01，P＜0.05)；益气化瘀补肾组SP水平明显高于益气化瘀组（P＜0.05）。RT-PCR模型组SP mRNA表达水平明显低于正常组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组、益气化瘀组、补肾组SP mRNA表达水平明显高于模型组（P＜0.01，P＜0.05）；益气化瘀补肾组SP mRNA表达水平明显高于弥可保组（P＜0.05）。
3.CGRP结果：Western blot模型组CGRP水平明显低于正常组（P＜0.01）；益气化瘀补肾组、补肾组、弥可保组CGRP水平明显高于模型组(P＜0.01，P＜0.05)。RT-PCR模型组CGRP mRNA表达水平明显低于正常组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组CGRP mRNA表达水平明显高于模型组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组CGRP mRNA表达水平明显高于弥可保组(P＜0.05)；益气化瘀补肾组CGRP mRNA表达水平明显高于补肾组(P＜0.05)。免疫组化：模型组CGRP阳性面积明显低于正常组(P＜0.01)；各治疗组CGRP阳性面积明显高于模型组（P＜0.01）；益气化瘀补肾组、益气化瘀组、补肾组CGRP阳性面积明显高于弥可保组（P＜0.01）。
4.NF结果：RT-PCR模型组NF mRNA表达水平明显低于正常组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组NF mRNA表达水平明显高于模型组（P＜0.05）。ELISA模型组NF含量明显低于正常组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组、补肾组、弥可保组NF含量明显高于模型组(P＜0.01，P＜0.05)；益气化瘀补肾组、补肾组NF含量明显高于弥可保组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组NF含量明显高于益气化瘀组(P＜0.01)；补肾组NF含量明显高于益气化瘀组(P＜0.01)。
5.VEGF结果：RT-PCR模型组VEGF mRNA表达水平明显低于正常组(P＜0.05)；益气化瘀补肾组VEGF mRNA表达水平明显高于模型组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组VEGF mRNA表达水平明显高于弥可保组（P＜0.01）；益气化瘀补肾组VEGF mRNA表达水平明显高于益气化瘀组（P＜0.01）。免疫组化：模型组VEGF阳性面积明显低于正常组(P＜0.01)；各治疗组VEGF阳性面积明显高于模型组(P＜0.01)；益气化瘀补肾组VEGF阳性面积明显高于益气化瘀组（P＜0.05）；益气化瘀补肾组VEGF阳性面积明显高于补肾组(P＜0.05)。
6.免疫荧光结果：镜下PGP9.5免疫阳性神经纤维为翠绿色，清晰可辨，多为圆点、线形，部分呈枝蔓状，神经纤维分布不均匀，大的神经束较多见，分布于胶原纤维之间。
7.新生血管水平：模型组成纤维细胞数量和微血管计数明显低于正常组(P＜0.01)；各中药治疗组成纤维细胞数量和微血管计数均高于模型组(P＜0.01，P＜0.05)；益气化瘀补肾组、益气化瘀组成纤维细胞数量和微血管计数高于弥可保组(P＜0.05，P＜0.01)。
结论：
1.益气化瘀补肾方组和拆方组均能明显提高失神经支配大鼠创面愈合率，缩短创面愈合时间，促进创面修复，其中以益气化瘀补肾方药效果最佳。
2.SP、CGRP、NF在mRNA和蛋白水平表达降低，VEGF在mRNA和蛋白水平表达降低，导致局部组织感觉减退，失神经保护以及缺血、缺氧，血管生成受阻可能是失神经支配创面较正常创面难以愈合的机制之一。
3.益气化瘀补肾法中药促进SP、CGRP、VEGF分泌，提高NF表达水平，修复神经损伤，改善神经保护作用，从而加速创面修复愈合。益气化瘀补肾法中药组和补肾组中药修复神经损伤作用稍显。
4.益气化瘀补肾法中药治疗后CGRP、VEGF表达水平提高，同时起到修复保护局部受损神经和促进血管新生作用，提示创面愈合过程中神经修复与血管生成直接相关。