rLj-RGD3含有三个RGD（Arg-Gly-Asp）模体,分子的质量为13.5k D,是一种来源于日本七鳃鳗口腔腺分泌液的毒素蛋白。rLj-RGD3具有极强的抗肿瘤功能,已经被证明对人宫颈癌以及黑色素瘤等多种肿瘤有抑制作用。但目前还没有报道证实rLj-RGD3对人肝癌BEL-7402细胞是否有影响。肝癌是常见的肿瘤之一,预后差,极易发生转移,患者生存率很低,给患者造成极大的痛苦。因此,本论文将探究重组七鳃鳗毒素蛋白rLj-RGD3对人肝癌BEL-7402细胞的影响。为了研究rLj-RGD3对人肝癌BEL-7402细胞的影响,本论文针对rLj-RGD3对肿瘤的增殖、迁移、浸润、凋亡等几个关键性步骤的功效进行了测定。细胞增殖实验（MTT法和吉姆萨染色法）表明,亲和层析纯化后的rLj-RGD3能够呈剂量依赖性地抑制人肝癌BEL-7402细胞的增殖,其作用的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)为5μM。Transwell法和细胞划痕实验结果证实,rLj-RGD3对b FGF（basic fibroblast growth factor）诱导的BEL-7402细胞迁移具有抑制作用,且呈剂量依赖性。利用人工基质膜Matrigel和Transwell细胞培养板模仿体内细胞外基质环境。细胞浸润实验的结果显示,rLj-RGD3对b FGF诱导的BEL-7402细胞浸润具有抑制作用,且呈剂量依赖性。接下来,本论文对rLj-RGD3能否引起BEL-7402细胞发生凋亡进行了测定。Hochest 33258染色、TUNEL-FITC染色和流式实验结果显示,rLj-RGD3能呈剂量依赖性方式显著诱导BEL-7402细胞发生凋亡。这表明了诱导细胞凋亡是rLj-RGD3抑制BEL-7402细胞增殖的基础。此外,鬼笔环肽-FITC染色结果表明rLj-RGD3能以剂量依赖性方式破坏BEL-7402细胞的骨架。最后,通过Western blot法进一步研究了rLj-RGD3作用于BEL-7402细胞的机制。结果表明其能抑制AKT的磷酸化,促使BEL-7402细胞的抗凋亡基因Bc L-2表达下调,促凋亡基因BAX表达上调,以及促使Caspase-8裂解成41 k Da亚单位的水平增加。综上所述,rLj-RGD3能够抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖、迁移、浸润,并且最终能够诱导人肝癌细胞BEL-7402发生凋亡。随着对rLj-RGD3的深入研究,rLj-RGD3有望成为治疗人肝癌新的药物。