【摘 要】
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目的:探讨糖尿病状态下代谢因素例如葡萄糖、TNF-α、ox-LDL对巨噬细胞类泛素折叠修饰蛋白Ufm1表达的影响,并对其具体机制进行探讨。方法:通过免疫荧光显微镜观察Ufm1蛋白在Raw2
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目的:探讨糖尿病状态下代谢因素例如葡萄糖、TNF-α、ox-LDL对巨噬细胞类泛素折叠修饰蛋白Ufm1表达的影响,并对其具体机制进行探讨。方法:通过免疫荧光显微镜观察Ufm1蛋白在Raw264.7细胞中的表达和分布;分别用不同浓度的葡萄糖、ox-LDL、TNF-α和内质网应激抑制剂(4-PBA)体外处理小鼠-单核巨噬细胞系RAW264.7,采用Real-Time PCR技术检测ERS相关因子(GRP78、XBP1)和Ufm1mRNA的表达,采用Western blotting法检测ERS相关因子(BIP)及Ufm1蛋白的表达。结果:Ufm1蛋白主要表达于Raw264.7细胞的胞质和细胞核中,且分布均匀。经TNF-α诱导的RAW264.7细胞中Ufm1mRNA表达量明显高于对照细胞(P<0.05);经ox-LDL诱导的RAW264.7细胞中Ufm1mRNA和蛋白的表达量均明显高于对照细胞(P<0.05),同时ERS相关因子的表达量也明显高于阴性对照细胞(P<0.05);经ox-LDL和内质网应激抑制剂(4-PBA)共同处理的RAW264.7细胞中Ufm1mRNA和蛋白的表达量均明显低于单用ox-LDL处理的细胞(P<0.05),同时ERS相关因子的表达量也明显低于单用ox-LDL处理的细胞(P<0.05)。结论:ox-LDL可以诱导小鼠-单核巨噬细胞系RAW264.7中Ufm1的表达升高;同时发现ERS相关因子表达量升高;内质网应激抑制剂(4-PBA)可以抑制ox-LDL诱导的Ufm1表达,同时内质网相关基因表达也受抑制;提示ox-LDL可能部分通过ERS途径影响巨噬细胞Ufm1的表达从而参与糖尿病动脉粥样硬化过程。
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