啤酒花中植物雌激素样作用物质的提取分离工艺研究及含量分析

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啤酒花(Humunus Lupulus L)是桑科葎草属多年生草质蔓生藤本,雌雄异株,花单性,雌性球穗花序简称酒花。酒花主要用于啤酒酿造工业,赋予啤酒苦味和香味。酒花亦作为一种植物药被国内外广泛使用。国外将其用于治疗消化不良、不安、失眠等;我国药典上记载酒花的乙醇浸膏用于治疗麻风病、肺结核病和细菌性痢疾等症。 植物雌激素是从植物中提取的一种天然化学物质,被作为雌激素替代疗法的“天然代用品”,可以起到雌激素的作用,对雌激素相关的症状具有广泛潜在作用,同时还可以防止雌激素不良反应的发生。啤酒花是具有雌激素样作用的传统中药,其中所含的蛇麻酮具有较强的雌激素作用,本研究主要着眼于酒花的综合利用,全面细致地研究啤酒花中雌激素样作用物质的提取工艺、分离方法及检测方法,找出了植物雌激素样作用物质的最佳提取工艺路线,主要结果如下: (1) 对比分析了香型和苦型啤酒花中雌激素样作用物质含量,结果表明:苦型酒花含量明显高于香型酒花。 (2) 高效液相色谱法测定蛇麻酮含量时,采用反相液相色谱柱SymmetryC184.6×150mm,以0.8mL/min的甲醇:水(85:15V/V,磷酸调pH2.4)作流动相,紫外检测波长为280nm。得线性回归方程为Y=-12677.02+6.09698×106X,r=0.99927,加样回收率98%-102%,在0.0496-0.794(mg/ml)范围内呈良好线性关系。 (3) 从提取溶剂及提取条件等方面对啤酒花植物雌激素提取工艺进行了优化研究。用单因子实验对提取条件进行了筛选,用正交分析实验对提取条件进行了分析研究,结果表明甲醇浓度、提取温度、提取时间、料液比都对啤酒花植物雌激素提取产生一定的影响,其中甲醇浓度和提取温度的影响最为显著。 (4) 采用超声波辅助方法提取,单因子试验和正交实验结果表明甲醇浓度、超声波频率、提取时间、提取次数、料液比对啤酒花植物雌激素提取产生一定的影响,其中甲醇浓度和提取次数的影响最为显著。通过实验对比,优化得到最佳的超声波辅助提取条件为:甲醇浓度为95%以上,提取三次,,在此条件下啤酒花中雌激素样作用物质的最大提取率为92.72%。 (5) 溶剂萃取法:蛇麻酮的纯度为56.85%,回收率为68.26%。 (6) 硅胶柱层析法:蛇麻酮的纯度为78.95%,回收率为76.56%。 (7) 聚酰胺柱层析法:蛇麻酮主要保留在70%甲醇洗脱产物中,蛇麻酮纯度为
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