蝴蝶兰目前是栽培最广泛和最受欢迎的一类兰花，花期调控是其生产中的关键技术之一。本文从蝴蝶兰中克隆了两个开花调控基因，即光周期调控途径中的关键基因CONSTANS-Iike(COL)和花分生组织决定基因LFY/FLO，并系统研究了这两个基因的表达特性及功能。主要研究结果如下：　　 1.采用RT-PCR和RACE相结合的方法，从蝴蝶兰中克隆到光周期调控途径中的关键基因COL和花分生组织决定基因LFY/FLO，分别命名为PhaICOL和PhaILFYoPhaICOL全长cDNA序列为1202bp，ORF为987bp，编码329个氨基酸。DNA序列包含两个exons和一个简单的intron，intron长为106bp。PhaILFY全长cDNA序列为1655bp，ORF为1422bp，编码474个氨基酸。　　 2.PhalCOL的氨基酸结构域分析显示它有COL家族的结构特征，即包含两个B-box锌指结构域和一个CCT结构域：氨基酸序列的同源性分析显示PhaICOL和大麦中的COL同源性为49％，和水稻中的Hdl同源性为45％，和拟南芥中AtCOL4的同源性为46％，AtCOL3的同源性为45％以及AtCO的同源性为36％。其B-box结构域和CCT域的保守性更强，PhalCOL的B-box和CCT域与水稻的Hdl同源性分别达70％和100％；与大麦的COL的分别达77％和91％。进化树结果显示PhaICOL与拟南芥的COL3，COL4，COL5和萝卜的COL1处于一个进化枝上，大麦的COL与PhalCOL遗传距离最近。PhalLFY的氨基酸结构非常保守，在N-和C-末端都有两个保守的结构域，它包含亮氨酸重复区域，酸性区域，碱性区域；氨基酸序列的同源性分析显示PhalLFY分别与倒距兰LFY的同源性为68％、与红门兰LFY的为67％、与风信子LFY-like的为61％，与水稻RFL为的60％、与百合LFY1的为59％、与金鱼草FLO的为59％、与拟南芥LFY的为54％。进化树显示所有的LFY/FLO同源基因被分成双子叶和单子叶两个分支，PhalLFY属于单子叶分支。　　 3.Semi-quantitativeRT-PCR分析结果显示PhalCOL和PhalLFY在未成年苗和成年苗的根、茎、叶及花梗中都有表达；PhalLFY在未成年苗的各个器官中的表达都非常弱；在不同的发育阶段，PhalCOL在叶片中的表达都很强，PhalLFY在根中的表达都很弱，它们在茎部的表达都随花梗的发育而发生明显的变化。　　 4.Situ-hybridization分析显示PhalCOL和PhalLFY首先都在花序分生组织中高度表达，随后在花分生组织和花原基中表达，最后在萼片原基、花瓣原基和唇瓣原基部位强烈表达。PhalCOL和PhalLFY在花蕾的各个器官中(萼片、花瓣、唇瓣、柱头、花粉粒、药帽、蕊喙)都有表达，它们在花粉粒中的表达都强于其它部位；PhalCOL在药帽和蕊喙中也有很强的表达，而PhalLFY在花瓣和柱头中有很强的表达。　　 5.将PhalCOL和PhalLFY基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因融合后在洋葱表皮细胞内瞬时表达，研究表明PhalCOL和PhalLFY都定位于细胞核。　　 6.利用载体pBl121，构建了35S::PhalCOL和35S::PhalLFY的超表达载体，通过叶盘法转化到烟草中。表型观察发现T1代的转PhalCOL基因烟草早期营养生长要快于野生型，10个转化株系的开花时间平均比野生型早21天，说明PhalCOL对烟草的开花有促进作用：To代的转PhalLFY基因烟草与野生型相比，开花时间平均比野生型早9天，且腋芽更易分化成花枝，还使叶形发生改变。