生物表面活性剂因其无毒、可自然降解、高效等特性作为化学合成表面活性剂的替代品已被广泛研究,其中由Pseudomonas sp.微生物合成的鼠李糖脂是最具有开发潜力的生物表面活性剂。已报道的鼠李糖脂合成菌株生产能力有限、碳源成本较高、结构多样等因素,导致其合成成本较高、发酵生产规模有限,限制了其在不同领域的应用开发。为了降低生物表面活性剂的合成成本,拓展其应用领域,本研究从西郊污水底泥中筛选出一株可产生物表面活性剂的菌株,该菌株在显微镜下呈发亮的短杆状,单菌落较小,为边缘规则、表面光滑、中间凸起的圆球状,是革兰氏阴性菌。其16S rRNA碱基序列的鉴定结果表明该菌株属于假单胞菌属,命名为Pseudomonas sp.PbA（GenBankID:MH930445）。该菌株在pH8.0、27℃、180 rpm的最适生长条件下,利用不含MgSO₄的无机盐培养基加入1%（w/v）葡萄糖和1%（w/v）硝酸钾,发酵得到0.54g/L黄色的生物表面活性剂。十六烷基三甲基溴化铵法（CTAB）、薄层层析（TLC）、气相-质谱联用（GC-MC）、红外光谱（FT-IR）分析结果表明,该生物表面活性剂为糖脂类阴离子表面活性剂,亲水端为鼠李糖脂,疏水端为十六烷酸。该生物表面活性剂的乳化指数为60.3%。本研究为丰富表面活性剂生产菌、拓展鼠李糖脂的结构以及开发其发酵生产流程提供理论基础。