降纤酶对兔急性脊髓损伤后血浆中FIB浓度及脊髓中GFAP和Vimentin表达的影响

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目的:观察兔急性脊髓损伤后血浆中纤维蛋白原水平变化规律,并进一步使用降纤酶干预,探索急性脊髓损伤后血浆中纤维蛋白原水平与胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白的表达及神经功能恢复之间的关系,为临床治疗脊髓损伤提供新思路。方法:选择新西兰大白兔60只,雌雄各半,体重2.5-3.0Kg。随机分为脊髓损伤生理盐水干预组(A组)20只、脊髓损伤降纤酶干预组(B组)20只、假损伤组(C组)20只。行T8椎体水平后路椎板切除开窗,脊髓损伤组用改良Allen’s法以10g×6cm力撞击脊髓,制造急性脊髓损伤模型,假损伤组只打开椎板,不打击脊髓。所有实验动物术后第1、2、3天肌注青霉素(20万U/d),脊髓损伤动物每日定时人工膀胱挤压辅助排尿至自主排尿恢复。A组给药方法:予5ml生理盐水腹腔内注射;B组:予注射用降纤酶10单位用生理盐水5ml稀释后进行腹腔内注射;C组:予5ml生理盐水腹腔内注射,所有动物注射均从术后第1天开始,每日1次,连续7日。在术前及术后不同时间点抽取血液标本(耳缘静脉)及时离心后进行纤维蛋白原水平测定,对每只兔行改良Tarlov评分,脊髓诱发电位检测,每组在术后1周、2周、4周随机处死5只,取标本行HE染色和免疫组织化学标记,对胶质纤维酸性蛋白及波形蛋白的表达进行半定量检测。血浆中FIB含量,改良Tarlov评分,SCEP检测潜伏期及波幅结果,胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白免疫组化阳性细胞计数结果以x±s表示。所得数据用SPSS16.0统计软件进行分析,计量资料时间因素单独效应分析采用重复测量的方差分析,分组因素单独效应分析,组间比较采用重复测量的方差分析,两两间多重比较采用LSD法,单独两样本均数间比较采用成组t检验,计数资料两组比较采用Wilcoxon检验和Mann-Whitney U检验,多组比较采用Kruskal-Wallis H检验。结果:1、A、B、C三组在手术前后血浆中纤维蛋白原水平均出现不同程度升高,术后1天即比术前显著升高,并且呈持续升高状态,7天达最高峰,随后开始出现下降,14天达正常水平。分别对A、B两组和B、C两组在相同时间点之间进行比较发现,在术后第3天血浆中纤维蛋白原水平差异具有显著性意义(P<0.05),B组低于A、C两组,至第14天时各组间差别无显著性意义(P>0.05);A、C两组在相同时间点之间比较组间差别无显著性意义(P>0.05);2、运动学评分和体感诱发电位显示A、B两组脊髓损伤前后改良Tarlov评分、潜伏期和波幅的变化均具有显著性意义(P<0.05),在A、B两组相同时间点之间比较发现,脊髓损伤7天后组间差别具有显著性意义(P<0.05),B组恢复情况好于A组;3、A、B两组行免疫组化标记胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白,统计阳性细胞计数显示两组之间在各时相差别均有显著性意义(P<0.05)。结论:1、动物遭受创伤后血浆中纤维蛋白原水平变化存在一定规律,其含量的变化可能是机体的一种非特异反应。2、脊髓损伤使用降纤酶组可降低损伤后血浆中的纤维蛋白原水平,促进脊髓损伤的恢复,机制可能是通过减少纤维蛋白原在脊髓损伤处的堆积,降低胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白的表达,为神经功能恢复提供有利条件。
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