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轮状病毒是引发全世界婴幼儿和动物幼仔急性胃肠炎的主要原因之一,由于轮状病毒引发的腹泻目前尚无特异性治疗药物,因此疫苗在轮状病毒的预防和治疗过程当中发挥着重要的作用。传统疫苗有成本高、引发肠套叠等缺点,因此人们需要开发更安全有效的新型疫苗。猪轮状病毒VP4和VP7是病毒的外壳蛋白,在诱导产生的中和抗体在病毒的清除和机体免疫保护方面都具有重要的作用。VP7蛋白作为轮状病毒外壳中最多的组分,可诱导机体产生中和抗体。VP4蛋白位于病毒颗粒的表面,并形成脊状突起,在胰酶作用下,VP4蛋白可以裂解为VP8~*与VP5~*。VP8~*在同血清型间高度保守,可激发同型保护。本研究以成功转化轮状病毒VP7、VP8~*、VP7-8~*基因的蛹虫草菌株为材料,验证了VP7、VP8~*、VP7-8~*蛋白的表达,进而通过免疫小鼠和乳鼠的攻毒等实验进行了免疫原性分析,研究结论如下:1、利用ELISA方法对重组VP7蛹虫草菌株、VP8~*蛹虫草菌株、VP7-8~*蛹虫草菌株的目的蛋白的表达量进行检测,目的蛋白VP7-VP8~*占蛹虫草冻干粉0.035‰;目的蛋白VP7占蛹虫草冻干粉0.0174‰;目的蛋白VP8~*占蛹虫草冻干粉0.016‰。2、以口服重组VP7蛹虫草菌株、VP8~*蛹虫草菌株、VP7-8~*蛹虫草菌株冻干粉方式免疫小鼠,免疫组小鼠均能产生唾液、粪便、小肠粘膜IgA抗体与血清IgG抗体;VP7-8~*组小鼠产生唾液、粪便、小肠粘膜IgA抗体与血清IgG抗体高于与VP7、VP8~*两组,并有显著差异。3、VP7、VP8~*、VP7-8~*三组免疫小鼠产生的血清抗体具有病毒中和能力,VP7-8~*蛹虫草菌组免疫小鼠病毒中和能力高于VP7蛹虫草、VP8~*蛹虫草组。4、VP7-8~*组小鼠的中和病毒的效果最好,本研究选此组继续乳鼠攻毒实验,VP7-8~*组免疫小鼠能够被动免疫子代小鼠且VP7-8~*组小鼠的子代乳鼠具有抗病毒能力与较轻的腹泻症状。5、本研究为菌物生物反应器生产疫苗奠定基础,为轮状病毒疫苗的研究提供一种新的生产方式。